1. 制备琼脂糖凝胶,尽可能薄。DNA样品与上样缓冲液混匀,上样。推荐使用的靶基因的上样量见不同条件下上样本的使用指针比较表。一般而言,对地高辛杂交系统,所需DNA样品的浓度较低,每道加2.5-5μg人类基因组DNA;如果基因组比人类DNA更复杂(如植物DNA)则上样量可达10μg;每道上质粒DNA<1ng。
2. 分子质量标志物(DIG标记)上样。
3. 电泳,使DNA条带很好的分离。
4. 评价靶DNA的质量。在电泳结束后,0.25-0.50μg/mlEB染色15-30min,紫外灯下观察凝胶。