1. 原理
利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖,然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。
2. 步骤
将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱,以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标本0.9mI。加上0.1mL 0.25mmol/L的海藻糖,混合后于37℃温育120min。生成的葡萄糖用POD-GOD方法测定,以每小时每升尿液中释放多少umol的葡萄糖量作为海藻糖酶的活性浓度。
3. 结果
IshiharaR等测定健康组尿海藻糖酶的活性是26.6±14”umol·h-1.gcreatinine-1。