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尿海藻糖酶的酶活性的测定

2022.5.10
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zhaoqisun

致力于为分析测试行业奉献终身

1. 原理

利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖,然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。

2. 步骤

将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱,以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标本0.9mI。加上0.1mL 0.25mmol/L的海藻糖,混合后于37℃温育120min。生成的葡萄糖用POD-GOD方法测定,以每小时每升尿液中释放多少umol的葡萄糖量作为海藻糖酶的活性浓度。

3. 结果

IshiharaR等测定健康组尿海藻糖酶的活性是26.6±14”umol·h-1.gcreatinine-1。


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