显微镜在现代科学中的应用已经很广泛。
显微镜种类按照大的类别分为光学显微镜和电子显微镜。
光学显微镜按照光路形式区别又可分为透射式和反射式;
电子显微镜可分为透射式和电子扫描式,与光学显微镜区别在于分别率大大增强,但一般要求样品置于真空室,某些样品并不适合。
这里以常见的反射式光学显微镜为例说明调整成像方法,透射式原理相同。
光学显微镜主要通过物镜组和目镜组成像,物镜和目镜通常都配有不同倍率的镜组。通过组合可以形成跨度非常大的放大倍率范围,这样配置是因为高倍镜组虽然细节显示清晰,但视野和景深狭窄,不便于在不同目标区域移动。低倍镜组虽然放大倍率小,但视野和景深均较大,便于大范围搜寻目标。再说某些特定样品也不需要很大的放大倍率,但要求视野内所有目标都尽可能清晰,所以低倍镜组也有用武之地。两者配合即可获得完美的清晰成像。
一、所需材料工具:
物镜组:如100x,200x,300x,600x等
目镜组:如5x,10x,15x,20x等
调焦手轮:包括粗调和细调
载物台:可在一个平面内任意方向移动,方便寻找目标区域
样品
光源
滤色片
二、步骤方法:
开启光源
旋转粗调手轮,将物镜组与载物台拉开至安全距离
根据经验,换上低倍物镜组和合适的目镜组
将经过必要处理的样品放上载物台
调节目镜瞳距
通过载物台移动样品,搜寻样品和目标区域,通过粗调手轮观察、选定目标
更换合适的高倍物镜和目镜,通过细调手轮仔细对焦
获得清晰成像后即可开展研究,必要时拍照
完成工作后关闭光源,将样品取下,物镜组和目镜组通常也必须取下放置在专用的干燥、阴凉处储存,如干燥瓶。
二、注意事项:
对焦的技巧:在细调对焦时,须有一个模糊-清晰-再模糊的过程,目的是确认寻找到的最精确对焦点,所以需要稍微过头,然后回转至清晰的对焦位置。
对于某些特定形状的样品,可以选择滤色片提高细节清晰程度。如,对狭窄波长敏感的物质、经过荧光染色的样品,可以在光路中插入特定颜色的滤色片。另外,为了观察金属样品中的特别组织,可以插入偏振片,调节角度,通过观察其反射的特定偏振光研究组织状况。