非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验步骤介绍

　　PAGE胶电泳缓冲液配置

　　1）丙烯酰胺单体贮液：14.55g丙烯酰胺加上0.45g N,N'-甲叉双丙烯酰胺,先用40mL双蒸水搅拌溶解,直到溶液变成透明,再用双蒸水稀至50mL,过滤。用棕色瓶4°C保存备用。

　　2)浓缩胶缓冲液贮液(0.5mol/L Tris-HCl,pH6.8)：3.03gTris溶解在40mL双蒸水中,用4mol/L盐酸调pH6.8。再用双蒸水稀至50mL。保存在4°C备用。

　　3)分离胶缓冲液贮液(1.5mol/L Tris-HCl,pH8.9)：18.16gTris溶解在80mL双蒸水中,用4mol/L盐酸调pH8.9。再用双蒸水稀至100mL,保存在4°C备用。

　　4)10%（APS）过硫酸铵：0.1g过硫酸铵溶入1.0mL双蒸水,使用前新鲜配制。

　　5)电极缓冲液(0.025mol/L Tris,0.2mol/L甘氨酸,pH8.3)：15.14gTris加上72.07g甘氨酸,用双蒸水稀释到5L。可在室温保存一个月。

　　6）样品缓冲液（0.1mol/L Tris-HCl,pH6.8）：2ml浓缩胶缓冲液贮液加上1mL87%甘油、0.1mg溴酚蓝,用双蒸水稀释至10mL,可在-20°C保存6个月。