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因为NI柱靠金属螯合层析--NI与6个或者更多的咪唑环结合而把蛋白结合下来的,这种结合里相对较弱,一般来讲,在过柱子的过程中有很多NI只与组氨酸标签中的一部分咪唑环结合,所以在这种情况下如果流速过快会阻碍他们进一步的结合,另外,流速过快大大缩短了NI与咪唑环结合的时间,减低了结合几率,所以用镍柱纯化蛋白时流速不要太快