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1、用DNase I处理双链DNA,使之随机产生单链断裂。
2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性从断裂处5‘除去一个核苷酸,同时5‘-3'聚合酶活性将一个放射性核素标记的单核苷酸引入到断裂的3'端。
3、反应重复进行,结果标记的核苷酸代替了原来的核苷酸残基,形成了放射性的DNA分子。