右旋糖酐铁注射液的检查及鉴别方法

鉴别

(1)取本品0.5ml,加水5ml,照右旋糖酐铁鉴别(1)项试验,显相同的反应(2)取本品的稀释液(1→10001ml,照右旋糖酐铁鉴别(2)项试验,显相同的反应

检查

分子量与分子量分布照分子排阻色谱法(通则0514)测定。供试品溶液取本品适量(约相当于铁50mg),加4mol/L磷酸二氢钠溶液2ml,摇匀,静置过夜,加水至10ml,滤过,取续滤液,即得。对照品溶液、系统适用性溶液(1)、系统适用性溶液(2)色谱条件、系统适用性要求与测定法见右旋糖酐铁分子量与分子量分布项下。限度右旋糖酐的重均分子量(M)应为5000~7500,分布系数D(M。/Mn)应小于1.8。pH值应为5.2~6.5(通则0631)。苯甲醇照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液精密量取本品1ml,置25m量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取苯甲醇约10mg,精密称定,置25ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀色谱条件用辛基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-乙腈-水(25:35:40)为流动相;检测波长为258m;进样体积10l系统适用性要求苯甲醇峰与相邻峰之间的分离度应符合要求测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有苯甲醇峰,按外标法以峰面积计算,每1ml含苯甲醇应为标示量的80%~120%。氯化物取本品1ml,照右旋糖酐铁项下的方法检查,与标准氯化钠溶液5.0m制成的对照液比较,不得更浓(0.5%)。重金属取本品2ml,照右旋糖酐铁项下的方法检查,含重金属不得过百万分之十五。砷盐取本品1ml,照右旋糖酐铁项下的方法检查,含砷盐不得过0.0002%。注射部位未吸收Fe含量供试品溶液和对照溶液的制备取体重1.5~2.5kg健康家兔2只,剪去后腿内侧的毛消毒注射部位,自半腱肌远侧末端插入针头,穿过缝匠肌注入股内肌中,每只家兔一侧后腿注射本品,另一侧作为对照,剂量按每1kg体重注射0.4ml(每1ml含Fe25mg)或0.2ml(每lml含Fc50mg)。给药7天后,处死动物,切开给药侧后腿皮肤。仔细检查注射部位,注射部位肌肉不能有暗褐色沉积,沿筋膜板不能有渗迹,如有上述现象,则判为不符合规定;注射部位肌肉有轻微着色的则进行如下试验。取出注射部位呈色的股内肌;对照侧后腿,取出与给药侧后腿相应部位与大小的股内肌,分别匀浆后,移至1000ml烧杯中,加2mol/L氢氧化钠溶液75ml和水适量,使没过肌肉,加盖煮沸至无固体物存在,放冷,小心加硫酸50ml,加热至沸,分次滴加硝酸约10ml,至无炭化物出现,加热除去过量硝酸,放冷,转移至250ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,分别作为供试品溶液与对照溶液。标准曲线的制备精密量取铁单元素标准溶液(每1ml中Fe100g)0ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml,分别置100ml量瓶中,加20%枸橼酸溶液10ml、巯基乙酸1ml,摇匀,滴加浓氨溶液至紫红色不再加深,用水稀释至刻度。以0管为空白,照紫外可见分光光度法(通则0401),在530nm的波长处测定吸光度,以含铁量(pg)与相应的吸光度计算直线回归方程。测定法精密量取供试品溶液和对照溶液各5ml,分别加硫酸3ml,加热至发烟,加硝酸适量,继续加热至溶液呈无色,放冷,加水20ml,煮沸3分钟,放冷,加20%枸橼酸溶液l0ml、巯基乙酸1ml,滴加浓氨溶液至紫红色不再加深,转移至100ml量瓶中,用水稀释至刻度,分别作为供试品测定溶液与对照测定溶液,以标准曲线项下0管为空白,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在530nm的波长处分别测定注药腿肌的吸光度A样与对照腿肌的吸光度A对。由直线回归方程查得Fe样和Fe对的含量,求出平均值,按下式计算: 注射部位未吸收Fe含量%=Fe样一Fe×50×100%注射量(Fe)注射部位未吸收Fe含量不得大于20%。过敏反应取本品,用氯化钠注射液稀释制成每1ml中含2mg(按Fe计)的溶液,依法检查(通则1147),应符合规定异常毒性取体重18~22g健康小鼠10只,分别自尾静脉注射用氯化钠注射液稀释成每1m1中含铁10mg的供试品溶液0.5ml,在5日内小鼠死亡数不得超过3只;如超过3只,需另取小鼠20只,重复试验;合并2次实验结果,小鼠死亡总数不得超过10只。细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1mg中(按Fe计)含内毒素的量应小于0.50EU。其他除可见异物不检查外,应符合注射剂项下有关的各项规定(通则0102)。