分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

mtt法原理和步骤是什么

2023.7.24
头像

超级艾蛋木啊

致力于为分析测试行业奉献终身

检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

(1)单细胞悬液接种于96孔培养板;103-104细胞/孔,每孔培养基总量200微升(96孔培养板每孔容积370微升),37℃、5%。

CO2培养箱中培养一段时间(根据实验目的决定培养时间)。

(2)加入2毫克/毫升的MTT液(50微升/孔);继续培养3小时。

(3)吸出孔内培养液后,加入DMSO液(150微升/孔),将培养板置于微孔板扳荡器上振荡10分钟,使结晶物溶解。

(4)酶标仪检测各孔OD值(检测波长570纳米)。记录结果,绘制。

d009b3de9c82d1581afdaece900a19d8bc3e4256?x-bce-process=image%2Fresize%2Cm_lfit%2Cw_600%2Ch_800%2Climit_1%2Fquality%2Cq_85%2Fformat%2Cf_auto


互联网
仪器推荐
文章推荐