悬浮细胞是一类生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长的细胞。与贴壁细胞相比,悬浮细胞难培养,易死亡,且不易转染。
对于这类难感染的细胞通常我们会优先选择病毒载体,而慢病毒载体具有可感染分裂与非分裂期细胞,表达时间长等优点,并已作为细胞治疗的理想载体得到广泛应用。然而,慢病毒感染悬浮细胞仍然会存在感染效率低的问题,基于这一点维真生物开发出一款助感染试剂可以让悬浮细胞的感染更加高效。
维真科研团队自研的慢病毒转导增强剂Lentiviral Transduction Enhancer(以下简称LVTE),此款助感染试剂能增强膜的通透性,显著提高慢病毒对悬浮细胞的感染效率。对于较难感染的悬浮细胞,使用本辅助感染试剂可以使细胞获得较好的病毒感染效果以用于后续实验。
1、K562细胞转导实验
细胞类型:慢性粒细胞白血病细胞K562
所用病毒:维真LV-EF1α-EGFP (8*10^8 IU/mL)
病毒MOI : 3
实验步骤:慢病毒感染K562细胞,一组添加维真病毒转导增强剂LVTE,一组不添加,72 h后流式鉴定GFP阳性细胞。
实验结果:如下图所示,未添加LVTE转导增强剂的一组,K562细胞阳性率为70.8%,而添加LVTE的一组,阳性率提高至90.4%。与对照组对比,添加慢病毒转导增强剂LVTE的一组,细胞阳性率得到明显提升。
2、T细胞转导实验
细胞类型:冻存人原代T细胞
所用病毒:维真LV-EF1α-EGFP(8*10^8 IU/mL)
病毒MOI : 3
实验步骤:使用慢病毒通过离心感染法感染T细胞,一组添加慢病毒转导增强剂LVTE,一组不添加,72 h后流式鉴定GFP阳性细胞。
实验结果:如下图所示,未添加LVTE转导增强剂的T细胞阳性率为23.5%,而添加LVTE的一组,阳性率提高至40.9%。这说明,添加慢病毒转导增强剂LVTE后,GFP阳性率同样得到了明显提升。
利用慢病毒载体进行悬浮细胞如T细胞的病毒转导往往效率较低,需要使用转导增强剂。维真生物新研发的慢病毒转导增强剂LVTE,无菌、低毒、高效、环保,具有增强慢病毒转导的能力,将慢病毒转导增强剂LVTE加入培养基中,LVTE可以增强细胞内外的跨膜转运,促进慢病毒进入靶细胞,进而大大提升慢病毒对这类难感染细胞的感染效率,是您悬浮细胞感染的不二选择。
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