简述硫酸链霉素的有关物质检查

　　检查：有关物质 照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。

　　色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.15mol/L的三氟醋酸溶液为流动相，流速为每分钟0.5ml，用蒸发光散射检测器检测（漂移管温度：110℃，载气流速：2.8L/min），取链霉素对照品适量，用水溶解并稀释制成每1ml中约含链霉素3.5mg的溶液，置日光灯（3000Lx）下照射24小时，作为分离度试验用溶液。取妥布霉素对照品适量，用分离度试验用溶液溶解并稀释制成每1ml中约含妥布霉素0.06mg的溶液，量取10&micro；l注入液相色谱仪，记录色谱图。链霉素峰保留时间约为10～12分钟，链霉素峰（相对保留时间为1.0）与相对保留时间为0.9处的杂质峰的分离度和链霉素峰与妥布霉素峰的分离度分别应不小于1.2和1.5。连续进样5次，链霉素峰面积的相对标准偏差应不大于2.0%。

　　取硫酸链霉素适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含链霉素3.5mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液适量，加水稀释制成每1ml中约含链霉素35&micro；g、70μg和140μg的溶液，作为对照溶液⑴、⑵、⑶。照含量测定项下的色谱条件，量取对照溶液⑵10&micro；l注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%～20%，精密量取对照溶液⑴、⑵、⑶各10&micro；l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。以对照溶液浓度的对数值与相应峰面积的对数值计算回归方程，相关系数（r）应不小于0.99。另取供试品溶液，同法测定，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，用回归方程计算，最大单一杂质不得过2.0%，杂质总量不得过5.0%。

　　取硫酸链霉素，用适宜溶剂溶解，转移至不少于500ml的0.9%无菌氯化钠溶液中，用薄膜过滤法处理后，依法检查（附录Ⅺ H），应符合规定。另取装量10ml中含2万单位的溶液0.25~0.5ml，3管在30~35℃培养，另3管在20~25℃培养，应符合规定。