眶后静脉窦注射(新生小鼠)
1. 将新生小鼠放在预冷的纸巾上 30-60s, 进行麻醉 ; 或: 在纸巾上滴加 0.5 mL 异氟烷,并将纸巾放入50 mL 的锥形管中,拧紧瓶盖,静置 1 min。将锥形管水平放置后放入小鼠,拧紧瓶盖,待小鼠完全停止活动后将其拿出;
注:避免新生小鼠直接接触冰块或麻醉时间过长以致小鼠死亡。
2. 将小鼠侧卧位置于手术平台,用拇指和食指(非惯用手)抓住头部,避免对小鼠施加过大压力;
3. 用酒精棉片对注射部位进行消毒处理;
4. 将 31G 注射器针头斜置于眼上(3 点钟位置), 以 30°角插入眶后静脉窦中心约 3 mm,并缓慢注入 50 μL 病毒悬液;
5. 等待 5 s,缓慢抽出针头,保持斜面向外,避免划伤眼睛,然后立即用纱布按压止血;
6. 确保小鼠的体温和体色恢复正常,用 70% 的乙醇浸湿纸巾后轻轻擦拭小鼠,再用使用过的鼠垫将其擦拭一遍,以去除外来气味,避免小鼠被排斥;
7. 使用加热垫帮助小鼠恢复,用 70% 乙醇浸湿过的纸巾擦拭母鼠鼻子后再将小鼠放回笼中。
眶后静脉窦注射(新生小鼠)(Gessler D J et al. Methods Mol Biol. 2019 )
眶后静脉窦注射(成年鼠)
1. 用异氟烷将小鼠麻醉后,使其背靠在非惯用手的手掌,并将拇指放置在小鼠气管侧面,施加温和的压力使小鼠的眼睛向外凸出;
2. 将 0.5mL 28G 注射器针头插入小鼠内侧眼角,保持斜面朝外并将针头以 45°角插入眶后静脉窦中心约 5 mm,缓慢注入 150-200 μL 病毒悬液;
3. 轻轻拔出针头,确保针头不会划伤小鼠角膜,然后用无菌纱布止血,并用药膏涂抹小鼠眼睛;
4. 注射完毕后,将老鼠放回笼子使其恢复。
眶后静脉窦注射(成年鼠)(Gessler D J et al. Methods Mol Biol. 2019 )