糖类化合物没有很好的发色基团,在UV/VIS检测上无吸收,因此,HPLC分析糖化合物时,通常会选择示差折光检测器(RID)、蒸发光散射检测器(ELSD)等通用型检测器。
蒸发光散射检测器(ELSD)
Sedex 100LT蒸发光散射检测器
通用型检测器,可以检测没有紫外吸收的有机物质。任何挥发性低于流动相的样品均能被检测,不受其官能团的影响。ELSD的响应值与样品的质量成正比,因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。
Ø 基线稳定。
Ø 对温度变化不敏感。
Ø 比RID灵敏度高
示差折光检测器(RID)
RID 2.1L 示差折光检测器(KNAUER,德国)
折射率是所有化合物的一个物理性质,因此RID对所有化合物都有响应,和ELSD一样是一种通用型检测器。
Ø 对糖类检测灵敏度较高
Ø 稳定性好
Ø 操作简便
RID与ELSD区别
l 检测灵敏度
ELSD比RID具有更高的检测灵敏度
RID(上)和ELSD(下)测定浓度为0.03mg/ml的混标
l RID的线性范围更宽,可以直接对未稀释的样品进行定性分析,简便快速。
Ø 本次实验ELSD的定量线性范围:0.03 mg/mL~1.50 mg/mL
Ø 本次实验RID的定量线性范围:0.30 mg/mL~3.00 mg/mL
l 考虑可操作性和成本,在灵敏度足够的情形下,建议RID作为分析糖化合物首选检测器
Ø ELSD检测需要通过加热和载气流来蒸发样品中的溶剂,需要合适的温度和气体流速调节来获得最佳的信噪比,相对RID操作繁琐
Ø ELSD通常需要额外配置气源(如钢瓶、发生器)供气,增加使用成本
Ø 德国KNAUER的RID具有平衡时间时间短、基线稳定等特点,操作简便快速
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