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一图在手,玩转二代测序 QC 全流程!

安捷伦视界
2020.6.10

二代测序(NGS)的建库流程是很长很复杂的,建库的每一步都建立在前一步的基础上,因而质量控制(QC)显得尤为重要。无论您的初始样本类型是什么,在整个实验流程中,确保靶标的完整性、大小和集中程度是构建高质量文库,进而获得准确、可重复的结果的关键。为了帮助您更好地确定实验流程,安捷伦汇总了各类初始样本的各种建库流程。

快来寻找你的专属路线图吧!

What Path Are You On?

测序过程中的关键 QC 步骤

Fragmentation

片段化是将样本剪切成更小的片段的过程。可以通过酶切或超声的方法来实现。QC 是这里的一个重要步骤,以确保片段化的条件是合适的。

Ligate adaptors

接头是已知的寡核苷酸序列,用于连接到未知的目标测序片段,提供测序引物结合区和样本识别码。接头连接后的 QC 可以确保接头成功连接到 DNA。

Size selection

片段筛选的目的是去掉多余的引物和接头序列,获得需要的目标序列。QC 在这一步是至关重要的,可以确保最后留下的是目标大小和足够浓度的文库。

Normalize/pool

在文库制备结束时,必须对样本进行量化,以确定要加载到测序仪上的文库量。如果需要多个文库混合上机测序,QC 可以帮助提供稀释指导,确保加载到测序仪上的文库是均匀的,有利于提高数据的均一性。

参与互动留言,获取精美礼品

本文中的哪些 QC 过程戳中你了?你还发现哪些关键 QC 步骤呢?欢迎在下方留言,指出需要的 QC 步骤并说明重要性,您也可以分享 QC 过程中的难忘经历,或者恼人的 QC 难题等等。

我们将从中选出 15 条留言作为精选留言,并有安捷伦 NGS QC 专家与您互动交流。本次留言活动截止到 6 月 12日 12:00,活动结束后,我们将主动与您联系获取您的收件地址,并送上精心准备的小礼品一份。

动动手指,赶紧写下你的想法吧!

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