今年的国庆节+中秋节
实现了3+7=8的奇迹！
最后一天，小编已经脑补了一万种
享受长假的姿势…
瘫要瘫得优雅，瘫出葛大爷的风采！
玩要玩得痛快，拯救景区KPI！
然而，最悲伤的事就是
假还没开始放，柱子先不行了…
我还没瘫呢，峰先瘫了…
明明之前结果是好的，
明明各种实验条件完全一致，
明明做过前处理……
为什么柱效就下降了？
难道说，实验室里真的有玄学？
▲图片来自网络
别急，让SGLC来给你号号脉，
柱子柱效下降，多半是脏的！
看下面几个案例，你是否中枪了呢？
案例一：分离度下降
▲一开始一切都很完美
▲一段时间后……
症状：做某化药的有关物质，流动相里有离子对试剂，柱子用了段时间，主峰和杂质峰分离度达不到要求了。
案例二：峰形放飞自我
▲某中药项目
▲一段时间后……
症状：做某中药的供试品，用了一段时间，产生肩峰。
案例三：柱压上升，仪器报警
症状：做某食品样品，用了一段时间，柱压上升，仪器报警。
你是不是也遇到过以上情况呢？
离子对试剂、食品、中药……
对于某些项目，色谱柱很难逃脱污染的宿命
一般情况下，正常的柱头应该是这样的
如果出现了上述异常，
你的柱头很可能是这样的
（前方高能）
▽被污染的柱头君1号
△被污染的柱头君2号
真是闻者伤心，见者落泪
好好的一根柱，还能用么？
别急，掌握以下方法，还能抢救一下！
思路一：
在液相分析过程中，柱子用了一段时间，常会遇到峰拖尾、峰前延、肩峰、峰分叉等头疼的问题，如果在相同条件下比较，通常都是色谱柱污染、柱头堵塞、固定相塌陷或柱头塌陷导致。其中如果筛板部分堵塞，直接影响样品液滴柱前变形，或柱压上升，此时通常建议将柱头拆下，将柱头放于异丙醇中超声20min。
正常筛板
堵塞筛板
峰形异常
而柱头塌陷，也会由于液滴的差速流动，导致变形，形成异常峰，如下图所示。此时较难修复，只能死马当作活马医，反接色谱柱使用，或者更换色谱柱。
柱头塌陷
柱头塌陷填料
塌陷对峰形的影响
即使样品和流动相已做过前处理，也仍难以完全避免柱子受到污染，因此有必要对柱子进行清洗。
思路二：清洗
一、反相色谱柱
1）常规冲洗方法
先用有机溶剂（甲醇或乙腈）和水混合溶液（溶剂：水=10：90）用小流速（正常使用流速的一半）冲洗20倍柱体积，再用纯甲醇用小流速（正常使用流速的一半）冲洗20倍柱体积。
温馨提示：如果用以上方法冲洗没有效果，如遇到强保留杂质，污染较严重，建议用以下冲洗方法：
▲成功案例——食品中5种添加剂色谱柱冲洗后效果
2）特殊的冲洗方法
对于含有离子对试剂的流动相，冲洗方法如下：先用乙腈水混合溶液（乙腈：水=50：50）冲洗10倍柱体积，再用乙腈水混合溶液（乙腈：水=10：90）冲洗20倍柱体积，最后用纯乙腈冲洗20倍柱体积
温馨提示：通常离子对试剂都是专柱专用，且离子对试剂会导致保留漂移，未平衡好或离子对试剂使用过量，都会引起保留漂移，如下图所示：
对于生物样品污染的色谱柱，冲洗方法如下：先用添加了三氟乙酸TFA的乙腈水混合溶液冲洗（A：0.1%TFA,B:0.1%TFA乙腈混合溶液，从5%B——100%B）梯度洗脱3次。
温馨提示：对于多肽或蛋白类样品，容易残留在反相色谱柱上，因此建议选择有惰性处理的色谱柱（Peek内衬）
>>有内衬的色谱柱，
二、亲水作用色谱柱（HILIC）
先用乙腈水混合溶液（乙腈：水=90：10）冲洗20倍柱体积；如果杂质吸附太强，常规清洗效果不明显，可以加大水比例，增加洗脱强度，先用纯水：乙腈=50:50清洗20倍柱体积，再用95%乙腈清洗并封存色谱柱。
三、正相色谱柱
先用正己烷乙醇混合溶液（正己烷：乙醇=98：2）冲洗20倍柱体积；如果杂质吸附太强，常规清洗效果不明显，可以增加洗脱强度，分别用100%正己烷、100%乙酸乙酯、三氯甲烷甲醇混合溶液（三氯甲烷：甲醇=50：50）冲洗，分别冲洗10倍柱体积，当回归到最初流动相条件时，请务必先用异丙醇过渡。
温馨提示：色谱柱应在清洗过程开始和结束时各测一次柱效，比较色谱柱性能是否有改善，以确定清洗的效果。确保色谱柱中没有样品和缓冲溶液，清洗前所用的溶剂应与最初清洗时所用的溶剂相溶，实验测试时所用的流动相与色谱柱最后的溶剂相溶。
当然，
防患于未然才是延长色谱柱寿命的关键！
之后我们会教大家如何利用一些小工具
延长色谱柱寿命~
如果您有色谱柱保养方面的问题，
也欢迎在下方写留言共同讨论~
好啦不啰嗦啦！
希望这些色谱柱保养小技巧，
可以帮助大家科学用柱，
早日下班！
享受完美假期~
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