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MaxPeak HPS技术知多少?一文带你解析

沃特世
2021.4.29

非特异性吸附?

无法检测到色谱峰,灵敏度不佳?

峰面积逐针增加,难以稳定?

数天的钝化、强酸洗、进样珍贵的样品?

无法预期的未知物漏检?

质谱未知加合物峰?

若您也正苦于上述问题,您有可能面临着“化合物丢失”的色谱挑战!其罪魁祸首之一就是非特异性吸附,在金属敏感性化合物分析上表现尤其显著。

如何解决这一难题?

沃特世近期全新发布的钛灰色ACQUITY PREMIRE超高效液相色谱或许能给您答案。它作为一款真正意义上基于MaxPeak HPS技术的惰性系统,可以显著减少分析物与金属表面的相互作用,让您的工作如虎添翼。

MaxPeak HPS技术原理是什么?

稳定性如何?

近日,Analytical Chemistry(美国分析化学期刊)发布名为《Using Hybrid Organic–Inorganic Surface Technology to Mitigate Analyte Interactions with Metal Surfaces in UHPLC》的文章,详细解析了MaxPeak HPS的技术原理以及MaxPeak HPS是如何解决上述问题。

文章开篇介绍了金属敏感性化合物(如富电基团化合物,典型的磷酸、羧酸等)与液相金属表面发生的非特异吸附,以及研究人员在不得已情况下采取的折中办法和不足。

注:传统液相使用的不锈钢、钛合金、PEEK内衬不锈钢等传统材料均不可避免。

沃特世历时数十年不断探究研发的MaxPeak HPS技术其实是一系列的“工程表面化学”。它采用有机/无机表面杂化技术,能在样品与系统及色谱柱的金属表面间形成屏障,尽可能解决金属敏感性化合物非特异性吸附问题。文章也揭开了这一“屏障”的神秘面纱。

图1.样品、系统和色谱柱的金属表面间的屏障。

杂化表面HST(Hybrid Surface)?

该屏障 - 杂化表面HST(Hybrid Surface),结合了BEH(ethylene bridged hybrid)杂化颗粒技术的丰富质控和内部改造经验,采用亚乙基桥联硅氧烷聚合物(O1.5SiCH2CH2SiO1.5)n,在金属基底上使用气相沉积工艺形成,并成功应用于仪器及色谱柱硬件。

文章随后分析了柱上进样20 ng核苷酸ATP、AMP,比较HST技术与传统技术色谱峰形和响应。AMP金属敏感程度中等,传统体系中AMP峰明显较宽,峰面积较低,随着HST技术的使用峰形变窄拖尾减少。ATP金属敏感程度高,即使在传统液相上采用HST色谱柱也存在严重拖尾和峰面积丢失。HST系统搭配HST色谱柱可获得更高的峰面积和更对称的峰形。

图2.柱上进样20ng核苷酸ATP、AMP,比较HST技术与传统技术色谱峰形。

进一步采用ATP测试,由于存在明显的金属吸附,传统色谱柱进样50针也无法达到预期峰面积();但采用HST技术色谱柱几乎第一针即可达到预期峰面积()。同时流动相pH在化合物等电点pI上下,传统液相峰面积丢失表现不一致;而无论流动相pH值如何,使用HST技术可获得更高、更一致的峰面积。

图3.采用HST技术色谱柱和传统色谱柱进行的ATP测试。

分析低含量化合物,如进样50pg ATP、ADP和AMP,采用HST技术均能检测到化合物,且信噪比高;如采用传统技术,ATP/ADP未检测到峰,而AMP峰形宽,信噪比低。

图4.采用HST技术和传统技术分析低含量化合物。

当传统液质联用分析时,Fe与化合物形成加合物,出现了更多加合物峰,再加上谱图拥挤,使质谱信号更难解释。文中在进行烯醇化酶T37分析时,HST技术硬件铁加合物丰度降低了80-90%,让获得的质谱数据质量更高。

图5.用传统液质联用和HST技术分析烯醇化酶T37。

在寡聚核苷酸的分析中,传统仪器和色谱柱的第一针进样较HST技术峰面积低3倍,经过处理后,传统分析峰面积有所提高,但始终无法达到HST技术开箱即得的峰面积。

图6.用传统仪器和色谱柱分析寡聚核苷酸。

小结

综上,采用HST技术(MaxPeak HPS技术)的ACQUITY PREMIER开箱即用,能尽可能减少未检测化合物的风险,提高分析物回收率和批间重现性,增强定性和定量分析结果完整性的信心,还可节约分析时间和费用。

文章信息

发布期刊:Analytical Chemistry 2021 93(14),5773-5781.

作者:Mathew DeLano, Thomas H. Walter, Matthew A. Lauber, Martin Gilar, Moon Chul Jung, Jennifer M. Nguyen, Cheryl Boissel, Amit V. Patel, Andrew Bates-Harrison, and Kevin D. Wyndham.

DOI:10.1021/acs.analchem.0c05203.

更多ACQUITY PREMIER应用,

敬请期待.....

参考文献

  Analytical Chemistry 发表文章,DOI:10.1021/acs.analchem.0c03863.

  JPBA发表文章,

  阅读沃特世白皮书:基于MaxPeak高性能表面的低吸附UPLC系统:ACQUITY PREMIER解决方案.

  详细了解ACQUITY PREMIER解决方案.

  详细了解ACQUITY PREMIER解决方案在寡聚核苷酸分析中的应用.

  阅读文章:利用创新型ACQUITY PREMIER解决方案降低金属敏感分析物分析中的变异性. 

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