本文是2021版AutoChrom软件新功能系列之三,建模软件LC-Simulator内可视化预测谱图中的梯度拐点,从而规避色谱峰在梯度点上出峰。
在利用梯度模型找方法时,通过点击图标,即可在预测色谱图子窗口中以垂直线显示当前梯度程序中梯度拐点的位置。每个梯度拐点在色谱图上显示的时间等于相应梯度点时间+ Dead Time + Dwell Time,并且在垂直线的上端会显示具体的%B数值。
其中梯度起点对应的时间不是0min而是Dead Time + Dwell Time。每台仪器对应的Dwell Time都不一样,可以采用实验进行测定。
Dwell的测定方法:用两通代替色谱柱
流动相A:纯水
流动相B:0.1%丙酮水(v/v)
流速:2mL/min
梯度:0-100%B(20min)
波长:265nm
按照下图方式计算出Dwell time (tD),
Dwell volume (VD)= tD × Flow Rate (F)。
未完待续
尽情期待