体积排阻色谱法（SEC）是对蛋白质等大分子进行分析的经典方法。而在众多的蛋白质中，FC融合蛋白在复杂的糖基化修饰的影响下，蛋白质结构和折叠也更加复杂，为SEC分析提出了更多挑战。对于FC融合蛋白的分析，研究人员往往需要谨慎地对SEC方法进行优化。而Biozen dSEC系列产品，基于其优秀的耐用性、稳定性，为FC融合蛋白的SEC分析提供了新思路。
图为：FC融合蛋白依那西普（Etanercept）结构图
依那西普（Etanercept）是一种高度糖基化的FC-TNFR融合蛋白，由于其经常会因唾液酸化，会与色谱柱填料间产生非体积排阻型的离子排斥作用力，干扰正常的SEC模式分离，并进一步造成峰展宽变大，影响蛋白质定量的准确性。为减少非体积排阻型作用力的干扰，应保证流动相内含有充足的共溶剂（如氯化钠或其他盐类）。以下实验中，采用高浓度的磷酸盐缓冲液降低离子排斥作用力。
LC色谱条件
色谱柱：Biozen® 3 μm dSEC-2, 200 Å
规格：300 x 7.8 mm
货号：00H-4788-K0
流动相：50mM Sodium Phosphate + 300 mM NaCl, pH 6.8
流速：1.15 mL/min
进样量：10 μL
温度：30 ℃
检测器：UV @ 280nm
样品：As indicated
采用高浓度的磷酸盐缓冲液
对依那西普（Etanercept）进行SEC分析的谱图
这一思路可以广泛应用于各类FC融合蛋白。阿柏西普是FC-VEGF融合蛋白，分析难度也高于普通的单克隆抗体。下图显示，采用Biozen dSEC色谱柱，实现了出色的分离，单体及聚集体峰的峰形良好。非常有助于精确的定量分析。
除了FC融合蛋白以外，Biozen dSEC可以应用于更多蛋白质及大分子的分析，是研究人员必备的分析利器。想要了解更多Biozen dSEC的应用和优秀分离表现，请关注5月31日上午十点，Phenomenex高级技术专家Kevin（招晖）老师的网络讲座，在讲座中我们将与大家进行探讨并分享体积排阻色谱SEC方法的可靠性和可转移性。
网络讲座
讲座时间：
5月31日 10:00-12:00
讲座主题：
体积排阻色谱法（SEC）的可靠性和可转移性
讲座概要：
体积排阻（SEC）色谱方法简介
仪器系统和色谱柱在方法转移时的注意事项
对传统方法进行升级时的注意事项
色谱方法的稳健性
SEC方法的批次间、色谱柱间的重现性问题
主讲人：
招晖 Phenomenex高级技术专家
讲师介绍：
Kevin在加利福尼亚州州立理工大学波莫纳分校获得生物医学学士学位，在德克萨斯州圣道大学获得工商管理硕士学位，在加利福尼亚州州立大学洛杉矶分校获得化学和生物化学硕士学位。现主要负责亚太区域尤其在中国市场的技术支持和业务发展。
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