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有奖互动 | 膜层析新利器,病毒纯化 So easy

赛多利斯实验室
2023.4.26

新型疫苗和疾病疗法研发中的病毒、病毒样颗粒和病毒载体纯化的需求越来越多,因此需要使用更高效的纯化技术。与蔗糖或氯化铯梯度离心相比,离子交换层析法具有诸多的优势:处理量大、病毒产量、纯度和感染性更高、处理时间显著缩短等。

赛多利斯开发的 Sartobind® 离子交换膜层析技术因为具有较大孔隙可以让目标分子通过基质进行对流运动,而不是扩散运动。这样就可以快速捕获目标(结合)并洗脱(解离),从而缩短循环时间。而且这种即用型膜层析的床体积更小,因而其对缓冲液的需求量也更低。产品形式上为了满足科学家灵活多样的需求,Vivapure 和 Sartobind® Lab 膜层析产品在设计之初就考虑到可通过离心、注射器、蠕动泵或 FPLC 系统进行驱动。

基于以上原因,加上 Sartobind® Lab 对病毒颗粒完全没有物理截留作用,因此对病毒纯化效果非常理想。下面让我们了解一下Sartobind® Lab 在疱疹病毒以及浓核症病毒纯化中的应用情况:

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使用 Sartobind® Lab S 100纯化疱疹病毒

纯化条件和步骤见表1。实验结果表明,大多数传染性伪狂犬病病毒 Kaplan 株 (PrV-Ka)和缺乏糖蛋白 gD (PrV-gD-Pass) 、以及牛疱疹病毒1(BHV-1) 是在 MES 缓冲液中用 400 mM KCl 洗脱后发现的。且超过 85% 的病毒在单一馏分中被洗脱(表2)。

表1. PrV和BHV-1的纯化条件

表2. 阳离子交换层析后PPrV和BHV-1的收率

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使用 Sartobind® Lab

纯化浓核症病毒

阴、阳离子交换层析膜均可以用来结合病毒颗粒,具体使用哪一种要由进料 pH 决定(表3)。本实验中Q柱有最佳的纯化效果。且结果显示,Sartobind® 没有尺寸排除效应,这表明膜层析柱是捕获大病毒的不二之选。

表3.Sartobind®Lab Q、D和S的浓核症病毒结合能力

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使用Sartobind® Lab Q 和S 离子交换膜层析进行病毒纯化

Sartobind® 实验室膜层析产品

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