中心碳代谢是一个由多个酶介导的复杂过程，包括糖酵解、磷酸戊糖途径和三羧酸循环等多个代谢途径，以及参与这些途径的各种酶和中间产物。然而，磷酸戊糖途径和糖酵解的诸多成分具有极性，且包含许多磷酸基团和异构体，使得这些组分的分析变得异常复杂。特别是这些代谢物中的磷酸基团会使其易于吸附到分析系统的金属表面，这种金属吸附会导致峰形变差，结果变异度增加，灵敏度下降，从而使测量结果变得不准确。
如何准确定量分析磷酸戊糖、糖酵解和能量代谢物？下面，小编给大家介绍一种采用靶向UPLC-MS/MS方法的新技术，该方法结合了ACQUITY Premier系统的优越性能和MaxPeak Premier色谱柱的最新技术，能准确定量分析血浆和组织提取物中的27种磷酸戊糖、糖酵解和能量代谢物。
实验条件
1.
色谱柱：Atlantis Premier BEH Z-HILIC色谱柱
该色谱柱采用耐用的BEH颗粒作为固定相，pH在2-10范围内稳定，结合新型磺基甜菜碱技术和MaxPeak HPS技术，有效减少磷酸化代谢物与金属表面的相互作用。
图1. Altantis Premier BEH Z-HILIC。
2.
样品及质谱参数：
大鼠血浆、大鼠肝脏和大鼠脑提取物中的27种分析物的名称及质谱参数条件如下：
表1. 质谱参数。
实验结果
1.
27种棘手代谢物的峰形对称且尖锐，回收率显著提高。
图2. 正离子和负离子电喷雾(ES)电离模式下的色谱图。
图3. 大鼠血浆和组织提取物中的分析物代表性色谱图。
2.
两对同分异构体5-磷酸核酮糖/5-磷酸核糖和2PG/3PG得到良好分离，峰形尖锐且对称，灵敏度高。
图4. 磷酸核酮糖/5-磷酸核糖和2PG/3PG在10 mM碳酸氢铵水溶液，pH 9.0流动相条件下的分离情况。
结 论
Atlantis Premier BEH Z-HILIC色谱柱采用BEH颗粒作为固定相，结合了新型磺基甜菜碱技术和MaxPeak HPS技术，能有效减少磷酸化代谢物与金属表面的相互作用。通过将Atlantis Premier BEH Z-HILIC色谱柱与ACQUITY Premier系统以及Xevo TQ-S micro三重四极杆质谱仪结合使用，能够更准确地定量分析血浆和组织提取物中的27种磷酸戊糖、糖酵解和能量代谢物。这对于理解中心碳代谢的生理过程以及相关疾病的机制具有重要意义，为相关领域的研究提供了有效的技术支持。
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