东曹生命科学(Tosoh Bioscience)是全球知名的色谱分离解决方案供应商,近日发布了一款新型疏水层析填料——TOYOPEARL Phenyl FT-750F,此款填料专为在流穿模式下纯化抗体而开发,即使在低盐浓度洗脱条件下也能有效去除抗体中的多聚体。
01
Phenyl FT-750F的产品特点
超大孔径 (>100 nm) :有效吸附如多聚体类的大分子杂质(图1)
强疏水性:即使在低盐浓度条件下也能实现流穿分离
上样量:50-100 g/L resin
优异的回收率>95%
对于疏水性较弱的样品,也可以采用吸附洗脱模式
02
Phenyl FT-750F的分离选择性
图2所示为Phenyl FT-750F与TOYOPEARL疏水填料家族的其他产品有着不同的分离选择性。
抗体吸附力: Phenyl-650M<Butyl-650M<Phenyl FT-750F<Hexyl-650C。
图2 Phenyl FT-750F与其他TOYOPEARL疏水填料的
分离选择性比较(单克隆抗体)
03
流穿模式下抗体的纯化效果
图3是使用Phenyl FT-750F在流穿模式下分离抗体时,在各种上样量及盐浓度条件下均可得到优异的纯度和回收率。可以使用0.15 mol/L NaCl进行洗脱。
图3 在不同上样量及盐浓度下纯度与回收率的变化
04
与市售同类HIC产品的对比
表1中显示了在疏水流穿模式下Phenyl FT-750F分离抗体可得到高纯度、高回收率的单体,优于其他同类市售HIC填料产品。
表1 Phenyl FT-750F与市售同类填料产品的比较
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