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捕集离子淌度质谱对D型L型氨基酸的手性鉴别

布鲁克质谱
2019.12.23

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氨基酸是构成蛋白质的基本结构,也是维持机体生理功能的关键分子。除了20种蛋白源性氨基酸外,还有数百种非蛋白源性氨基酸,它们也具有不同的关键功能。大多数氨基酸是手性化合物,虽然L型氨基酸是哺乳动物生物学中主要的活性形式,但D型氨基酸在生物体内和环境中的存在也已被广泛报道。多年来,已经发展了几种能够区分D型和L型氨基酸对映体的分析方法。液相色谱(LC)、气相色谱(GC)、毛细管电泳(CE)等分离技术是手性分析中最常用的方法。其对映体拆分原理主要依赖于手性固定相提供的选择性,分离时间一般在30min左右。

离子迁移率光谱(IMS)已被证明是一个强大的工具,可在毫秒级别的时间内快速分离异构体化合物。2011年,Fernandez-Lima等人提出了捕集离子淌度谱法(Trapped ion mobility,TIMS),其中离子在氮气气流的作用下进入漂移电场。气流给离子正向的推动力,而电场梯度给离子反向的作用力,根据离子的大小、电荷和形状来捕获和分离离子,通过这种模式可实现极高的离子淌度分辨率。

近日,Pérez-Míguez R.等在《analytical chemistry》上发布了最新研究成果,提出了一种基于捕集离子淌度质谱(TIMS-TOF MS)的新型氨基酸对映体分析方法,实现了氨基酸对映体的快速分离。通过手性试剂(+)-1-(9-芴基)氯甲酸乙酯(FLEC)衍生化形成非对映体,实现了对映体的拆分。

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电喷雾电离(ESI)在正模式下产生了加钠的FLEC-AAs离子,其中的非对映体可以被TIMS分离。对每个氨基酸优化了包括电压梯度、梯度时间和积累时间在内的TIMS条件,并确定了所有非对映体的碰撞截面(CCSs)。发现D型L型对映体的迁移顺序与氨基酸的结构有关。此方法允许同时进行多种氨基酸的手性分析,对应质谱设置三种不同的方法可实现所有对映体氨基酸的分析,加上衍生化的时间用时不到15min。
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