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如何让微生物研究如虎添翼,多组学了解一下?

TIANGEN
2022.2.21

随着科学家对生命奥秘的探索越来越深入,多组学数据整合分析已然作为“王牌策略”广泛应用于各生命科学领域。基因组学决定遗传基础,转录组学展示基因表达,调控组学助力调控机制研究,蛋白组学直观探索蛋白表达规律,代谢物组学作为信号放大器更是可以让我们看到一系列分子互作的结果最终反应在代谢产物上的变化,除此之外,还有表观组学、单细胞、ATAC等等。要更加清晰的揭示生物学过程的复杂性和整体性,多组学是必经之路,动植物研究是如此,微生物研究亦是如此。

今天与您分享,针对环境微生物展开多组学研究最常用的两大基础组合策略:

16S/宏基因组 + 代谢组

对于环境微生物研究,16S/宏基因组是基础研究手段,它可以清楚地展示微生物的组成、丰度及相关功能信息。在此基础上,我们可能想进一步探究:微生物对环境的影响、宿主次生代谢物对微生物的影响、微生物菌群参与的多种代谢调控途径等等。那么,要解决这些问题,代谢组学往往是一个神助攻,它建立了微生物与环境之间的桥梁。

题目:土壤代谢组学及微生物组学结合研究胡椒种植对土壤的影响

期刊:Science of the Total Environment

方案设计:胡椒根际土壤、空白对照土壤,5个生物学重复

组学设计:16S扩增子 + 非靶代谢

简析:根际土壤对植物生长发育起到关键作用,根际土壤微生物对有机化合物的代谢也会影响根部功能。本研究利用土壤代谢组学和微生物组学对胡椒根际土壤和空白土壤进行比较分析,揭示了根际分泌物可溶性有机碳(DOC)对土壤微生物群落组成有重要影响。代谢组学结果表明淀粉和蔗糖的代谢是根际土壤中改变最明显的途径,扩增子结果显示根际中变形杆菌和拟杆菌(富营养化)的细菌种类明显高于空白土壤,这些菌通常对植物根系分泌物产生积极的反应。最后通过代谢组和微生物关联分析发现蔗糖与土壤细菌成员之间的相关性最大,证实不同的细菌通过调节根际淀粉和蔗糖等代谢功能从而导致一系列不同代谢物的产生。

Song Y, Li X, Yao S, Yang X, Jiang X. Correlations between soil metabolomics and bacterial community structures in the pepper rhizosphere under plastic greenhouse cultivation. 

Sci Total Environ. 2020 Aug 1; 728:138439. 

doi:10.1016/j.scitotenv.2020.138439. Epub 2020 Apr 23. PMID: 32361108.

16S/宏基因组 + 宿主转录组

代谢组学的加入建立了微生物与环境之间沟通的桥梁,而进一步探索微生物与宿主的互作关系当然少不了宿主的基因表达数据,因此微生物组学与宿主转录组学的结合也是常见的策略之一。

题目:宏基因组结合宿主转录组宏调节新生反刍动物瘤胃发育

期刊:Genome Biology

方案设计:新生牛犊18只,分别在30min、第1周、第3周、第6周取瘤胃组织及其内容物

组学设计:宏基因组 + 真核有参转录组

简析:断奶前小牛的表型特征明显,出生后不久,小牛瘤胃内没有分离突出的乳突或复层鳞状上皮,断奶前乳突发育明显,总VFA、乙酸盐、丁酸盐等浓度随着年龄和饮食变化的增加而增加。宏基因组分析,断奶前(6周前)与“蛋白质和碳水化合物代谢”相关的微生物占主导地位。而VFA的浓度与活性黄氏乳杆菌密度和瘤胃乳头发育正相关。为了进一步挖掘微生物可能影响瘤胃上皮细胞的发育和组织代谢,作者结合宿主转录组,在小牛瘤胃组织中表达的共一万三千多个基因,并结合WGCNA分析聚类29个基因模块,这些基因模块显示与小牛表型性状的各种关联。最终揭示了在出生前反刍动物瘤胃中建立了动态、活跃的微生物组,通过与宿主的密切互作促进瘤胃发育。

Malmuthuge N, Liang G, Guan LL. Regulation of rumen development in neonatal ruminants through microbial metagenomes and host transcriptomes. Genome Biol. 2019 Aug 23;20(1):172. doi: 10.1186/s13059-019-1786-0. PMID: 31443695; PMCID: PMC6708143.

当然,微生物相关多组学思路远不止于此。在了解微生物基础组成及丰度的基础上,可以结合宏转录组深入研究功能基因的差异表达;可以结合宿主蛋白组或者宏蛋白组研究功能活性;可以在宿主转录组基础上加入调控组学进一步探索在微生物影响下的调控机制等等。不同组学结合多维度剖析生物学问题,也让我们的研究更加立体。

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