分析测试百科网

搜索

分析测试百科网 > 行业资讯 > 微信文章

寡核苷酸中杂质的HPLC分析

Shodex
2022.9.08
核苷酸片段缺失体

反义核酸等核酸药物的开发和品质管理中,需要开发尽可能从合成的目标寡核酸中分离出杂质的方法。以下是使用聚合物基质HILIC色谱柱HILICpak VN-50 2D进行20mer的目标合成寡DNA和19mer (n-1)、18mer (n-2)、17mer (n-3)的核苷酸片段缺失体HPLC分析的应用实例。HILIC模式基本上亲水性越强保留时间越长,所以按照各合成寡DNA聚合度由低到高顺序洗脱。本实验条件不需要离子对试剂,也不需要在流动相中添加高浓度盐,适用于寡核酸的LC/MS分析。

830a0ce146c3d98820d99392e7b6de89.png

4feacafa2eb34c592ac265b42849f4c0.jpeg

Sample : Synthesized oligo-DNAs (crude), 1 μL
1. 20mer, ATACCGATTAAGCGAAGTTT
2. 20mer, ATACCGATTAAGCGAATTTT
3. 20mer, ATACCGATTAAGCTAATTTT
4. 20mer, ATACCGATTAATCTAATTTT

8932eb7a9aef7d29d3c76b336ef94551.png

碱基序列差异

以下是使用聚合物基质HILIC色谱柱HILICpak VN-50 2D进行20mer的目标合成寡DNA和三种碱基序列差异(1,2,3处差异)合成寡DNA的HPLC分析的应用实例。导入不同类型的碱基会导致样品亲水性的变化,所以使用HILIC模式可以分离各种寡DNA。本实验条件不需要离子对试剂,也不需要在流动相中添加高浓度盐,适用于寡核酸的LC/MS分析。

830a0ce146c3d98820d99392e7b6de89.png

30fd9bfdcbc59a8228933f20ba7c35b3.jpeg

Sample : Synthesized oligo-DNAs (crude), 1 μL
1. 20mer, ATACCGATTAAGCGAAGTTT
2. 20mer, ATACCGATTAAGCGAATTTT
3. 20mer, ATACCGATTAAGCTAATTTT
4. 20mer, ATACCGATTAATCTAATTTT

201daf4b45e74b3f5b02bb6d6494a64e.png

371856a778b46cc23dcbe86039509782.jpeg
扫码关注Shodex
获取更多色谱资讯


发布需求
作者
头像
仪器推荐
文章推荐