一、详细介绍
常规转染技术可分为两大类,一类是是瞬时转染,一类是稳定转染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中、虽然可以达到高水平的表达,但通常只持续数天,在转染后24-72小时内(依赖各种不同的构建手段)分析结果,常常用到一些报告基因系统如荧光蛋白,β-半乳糖苷酶等来帮助检测。稳定转染则是外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白,需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒。建立稳定转染细胞系时,需根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶细胞进行筛选,常见的抗性标志物有潮霉素(hygromycin)、嘌呤霉素(puromycin)和新霉素(neomycin)。筛选得到的细胞能够稳定表达目的蛋白,可以用于目的蛋白的扩增和富集,或者得到稳定沉默特定基因的细胞株。
二、服务项目及周期