合生物信息分析方法,研究全基因组范围内整个染色质DNA在空间位置上的关系,获得高分辨率的染色质调控元件相互作用图谱。
(引自Pueschel R, Coraggio F, et al. From single genes to entire genomes: the search for a function of nuclear organization. Development , 2016 , 143 (6) :910)武汉金开瑞生物工程有限公司技术顾问、华中农业大学教授, 曹罡课题组与华中农业大学李国亮教授课题组在国际著名期刊Nature Genetic(IF=27.125)上联合发表题为“Digestion-ligation-only Hi-C is an efficient and cost-effective method for chromosome conformation capture”的研究论文。该论文主要介绍了一种新的染色体构象捕获技术(DLO Hi-C),此技术信噪比高,质量控制于早期,为解析基因组三维结构提供了一种新型、高效、经济的研究方法。
DLO Hi-C实验流程
EGS和甲醛双交联——同时消化和连接——近端连接和酶切——固定80bp短片段建库测序——分析
特点:双交联,两次连接消化,收集测序固定片段;无稀释液体交联,无生物素。
技术优势
● 微量细胞建库:正常建库与生信分析的样本量可低至10万个核
● 高成功率:细胞样本文库构建成功率几乎为100%
● 建库周期短:只需执行两轮简单的消化和连接步骤即可获得高质量的文库。
● 数据更准确:测序前质检,确保数据准确性
● 分辨率更高:在测序数据量更少的情况下,互作矩阵分辨率更高,染色质结构分析得到的数据也更多
● 较高的信噪比:使用多种措施来减少噪音,保证高质量的数据输出,分析更准确
● 量身定制个性化分析方案:提供DLO Hi-C的标准分析外,更注重与RNA-Seq、ChIP-Seq、ATAC-Seq和甲基化等多组学表观遗传分析,提供个性化的生信分析方案
研究思路
Hi-C可以与RNA-Seq、ChIP-Seq、ATAC-Seq等数据进行联合分析,从基因调控网络和表观遗传网络来阐述生物体性状形成的相关机制。
结果展示
1、几种不同的Hi-C衍生方法的对比分析
2、几种不同的Hi-C的衍生方法的矩阵图
3、较优的三种Hi-C衍生技术的A/B compartments 、TADs、Loops 的数据读取。
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