慢病毒构建与包装

定义

      慢病毒是逆转录病毒的一种，具有逆转录病毒的基本结构和特性：整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动物制备；但也有不同于逆转录病毒的组分和特性：比逆转录病毒具有更高的滴度，不仅可以感染分裂期细胞，更重要的，还能感染非分裂期的细胞。利用慢病毒载体，可以研究启动子的调控、过表达特定基因或沉默特定基因。

慢病毒包装系统组成:

      慢病毒包装系统一般由慢病毒表达载体和慢病毒包装载体组成。

      慢病毒表达载体，即通常所说的穿梭载体，包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。而慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装， 包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染。

      慢病毒(Lentivirus) 载体是以HIV-1 (人类免疫缺陷Ⅰ型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。所以，在体外实验及体内实验的研究中，慢病毒己经成为表达外源基因或外源shRNA的常用载体形式之一， 并且正在获得越来越广泛的应用。

一般实验流程

客户须知

客户需提供已通过文献查询或实验证明的有效靶点序列信息的shRNA的序列

服务内容

1、我们按照客户要求完成shRNA慢病毒产品的制备，可以提供慢病毒shRNA质粒和shRNA慢病毒产品等。

2、定制RNAi慢病毒产品可直接用于细胞系，原代细胞，干细胞，动物组织等的感染，表达shRNA。