实验技术服务-细胞凋亡检测

实验原理

      细胞凋亡（Cell apoptosis）是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用，它并不是病理条件下的损伤，而是为更好地适应生存环境而主动发生的一种死亡过程。

      细胞凋亡检测的方法很多，我们采用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡，其原理是：磷脂酰丝氨酸（Phosphatidyl serine, PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin-V进行EGFP融合、荧光素（FITC、PE）或biotin标记，以标记了的Annexin-V作为荧光探针检测PS的外翻。。但坏死细胞PS 亦暴露于外表使Annexin V 结合阳性,因此使用Annexin V 这一参数不能区分坏死和凋亡,必须同时采用PI 这一参数将坏死细胞区分开来。

实验流程

实验结果