实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR),简称Q-PCR,是一种在扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物的总量,通过内参或者外参法对待测样品中的特定基因序列进行定量分析的方法。
实时荧光定量PCR服务流程
1)样品核酸提取,PCR引物设计与合成
2)引物调试(预实验)
3)PCR扩增检测
4)数据汇总初步分析
标准品合成及标准曲线构建(绝对定量)
样本寄送
新鲜或保存完好的样品——细胞:≥1×106,组织≥20 mg,血液≥200μl。组织样品用液氮速冻后保存于-80℃,细胞也可以在加入Trizol后保存于-80℃,后续样品需用干冰寄送。样品需要注意避免各类污染和反复冻融。
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