鼠单克隆抗体制备-基因免疫技术     

 
一、基因免疫技术介绍

  Cambridge Bio的基因免疫鼠单克隆抗体制备技术，是Cambridge Bio的科学家们对基因疫苗长期研究成果进行优化的基础上完成的，其原理是通过小鼠肌肉注射编码目标抗原的质粒DNA，在小鼠体内指导具有天然构象目标抗原蛋白的合成，该新产生的外源蛋白激发和诱导小鼠的免疫反应，并通过多种形式的免疫加强（重组真核蛋白）来提高免疫应答水平。该技术有以下几方面的优势：
（1）由此制备的单抗具有表位广谱性，能识别种类各异的抗原表位，包括线性表位、蛋白糖基化或其他转译后修饰相关表位，以及构象性表位等，有助于筛选靶抗原蛋白上识别位点不相重叠的高亲和力配对抗体。
（2）每次免疫后得到目标抗体的成功率为80% （传统方法的成功率为30%左右）。且从基因到单克隆抗体仅需3个月（比传统方法省出一半的时间）。
（3）利用DNA免疫能诱导产生高亲和力抗体的特性，并通过用重组蛋白或重组病毒的异质性（heterogeneous）免疫加强来提高免疫应答水平，从而获得表达高亲和力抗体的亚克隆。

   下表：同一靶蛋白用不同免疫方法制备鼠单抗的几项指标比较（实验数n=15）

免疫方法	独立的亚克隆数	每个融合的亚克隆平均数	识别线性表位的亚克隆数	识别天然蛋白的亚克隆数	识别天然蛋白的亚克隆百分比
多肽	48	3.2	35	7	14.5
原核蛋白	68	4.5	59	2	2.9
真核蛋白	75	5	54	75	100
GInerator™	155	10.3	43	155	100

 
二、服务内容
   我们提供的单克隆抗体制备服务，包括人缘化靶蛋白基因合成，免疫载体组建和重组真核蛋白抗原免疫生产。在免疫与融合成功之后，首次交付四个杂交瘤细胞培养上清评估，承诺免疫原ELISA检测阳性，抗体筛选阶段包被抗原浓度为2ug/mL，1:5000 稀释度OD450-空白对照>1.0为阳性，最终交付2个最佳的杂交瘤细胞，及对应的各1mg纯化抗体，0.1mg纯化的重组真核蛋白（纯度≥95%），16周时间，承诺保证满足WB、IHC、IP、IF等其中一项实验要求。我们同时提供细化抗体应用的服务，比如WB、IP、IF检测实验，抗体分型测试，酶标和胶体金配对抗体筛选等服务。

三、重组蛋白制备平台
   作为GInerator™基因免疫技术的辅助平台，我们建立了多样化的重组蛋白表达系统，包括哺乳类动物细胞表达系统，昆虫细胞表达系统，酵母及大肠杆菌表达系统，可生产难以表达且具有天然构象和生物活性的蛋白。
 
四、诊断试剂盒的研发，研究CRO
       此外，在基于GInerator™的先进技术平台上，我们还提供全面的生物医学产品定制和合同研究CRO服务。包括：
     1. 研究用检测试剂盒和临床诊断试剂盒的开发，免疫测定等研发CRO。
     2. 研究用、临床前、临床用重组蛋白和抗体的生产。
     3. 单克隆抗体的深入应用，包括研究用，临床诊断，和作为候选性的抗体治疗。
 
     目前我们的基因免疫技术已经广泛地应用于抗体、重组蛋白和试剂盒生产，得到了客户的一致认可，技术应用参考文献：
   1. J. Virol., Aug 2012; 86: 7760 - 7770. 美国国立卫生研究院，NIAID疫苗研究中心.
       The ELISA plate was coated with either SIVmac239 gp140 or HIV gp120B.
   2. J. Virol., Jan 2012; 86: 1145 - 1157. 哈佛大学医学院.
       Antibody reacted with recombinant SIVmac239 proteins gp140 and gp120 .

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