EMSA检测实验
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EMSA检测实验

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  • 产地上海
  • 型号EMSA检测实验
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上海代轩生物科技有限公司

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产品描述
                           EMSA检测
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测 如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异), 和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

一、服务流程:
1、核蛋白样本提取与蛋白定量。
2、生物素标记DNA3’端并去吹TdT。
3、Super-Shift反应,配制6.5%聚丙烯酰胺凝胶,配制好各反应体系,EMSA室温结合反应20min,电泳上样。
4、电转膜,操作方法同常规Western blot转膜操作。
5、紫外交联,将核酸交联于PVDF膜上。
6、化学发光法检测生物素标记的探针


二、客户提供:客户提供组织、细胞样品

三、结果提供实验数据分析、实验方法及样品EMSA电泳图。
 


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