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价格:
1000
RACE
产品属性
品牌
亿鸣复兴生物
产地
北京
型号
RACE
关注度
0
信息完整度
关闭
产地:北京; 品牌:亿鸣复兴生物
北京亿鸣复兴生物科技有限公司
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亚克隆技术
产品描述
★服务描述:
RACE(rapid-amplification ofcDNA ends,RACE) 即 cDNA 末端快速扩增技术,是基于PCR
技术基础上由已知的一段
cDNA
片段,通过向两端延伸扩增从而获得完整
cDNA
的
5'
和
3'
末端的有效方法,无需构建
cDNA
文库,即可在短时间内获得目的基因
cDNA
序列,具有简单、
快速、廉价等优势,在
cDNA
文库的构建及筛选,新基因的发现等方面得到了广泛的应用。
★服务内容:
RNA 提取、定量及反转录
RACE(3'和 5'-RACE)
结果分析及实验报告
★服务流程:
1、3'-RACE 的技术
利用连有
SMART
寡核营酸序列通用接头引物的
Oligo(dT)30MN
作为引物反转录
mRNA
,形成
cDNA
链,然后以
cDNA
为模板,基因特异引物
GSP1(gene
specific
primer,GSP)
作为上游引物,含有部分接头序列的通用引物
UPM(universal
primer,UPM)作为下游引物,PCR
扩增目的基因的
3' 末端。
2、5'-RACE 的技术
利用连有
SMART
寡核营酸序列通用接头引物的
Oligo(dT)30MN
作为引物和反转录酶
MMLV
反转录
mRNA
,形成
cDNA
。反转录时,利用该反转录酶具有的末端转移酶活性,在
cDNA
的
5'
末端自动加上
3-5
个(
dC)残基,退火时
(
dC)
残基与含有寡核苷酸序列
Oligo(dG)
的通用接头引物配对,进而转换为以
SMART
序列为模板继续延伸而连上通用接头
.最
后以含有部分接头序列的通用引物
UPM(universal
primer,UPM)作为上游引物,目的基因
特异引物
2(GSP 2 genespecific primer,GSP)
作为下游引物,
SMART
第一链
cDNA
为模
板,
PCR
扩增目的基因的
5'末端。
★需要提供的信息:
(
1)您可以选择提供样品组织材料,或是材料的总RNA:但必须保证您提供的实验材料新鲜,请您采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂;您提供的总RNA必须无降解,无基因组DNA污染,OD260/OD280在1.8-2.0之间。
(
2)3'RACE实验要求总RNA量大于10 mg,5' RACE实验要求总RNA量大于15 mg。如果基因的丰度较低或者未知序列较长,根据具体实验的情况增加实验材料的量。
(
3)已知的参考序列长度≥150 bp。我们将对已知序列进行验证,如果验证结果与您提供的序列完全不符,我们将停止实验并收取实验成本费用。如果验证结果与您提供的序列有个别碱基不符,我们在征求您的意见后决定是否进行RACE实验。
★服务周期:
4-5周(20-25个工作日)
★服务说明:
客户必须保证所提供的文献材料的准确性,如果是因客户自己的原因造成实验的失败,后果由客户承担。
★服务承诺:
扩增片段的电泳图,含
3'
和
5'-RACE PCR
片段的质粒载体细菌一份;
全长
cDNA 序列及测序报告;
RACE 实验步骤、使用仪器、引物序列等。
★其他服务项目:
★项目一般流程:
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