荧光定量PCR检测服务

　　1.服务描述

　　荧光定量PCR技术(Fluorescence Quantitative Real Time PCR，RT-PCR)是在常规PCR技术的基础上引入了一种荧光化学物质。该荧光物质能够随着PCR反应产物的不断累加，产生成比例的荧光信号强度。这样就可以通过监测荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测。目前，实时荧光定量PCR技术已经广泛的应用于生物基础科学研究、医学临床诊断、疾病研究及药物研发等领域。本公司可根据您的科研需求，为您提供SYBR Green染料法或TaqMan探针法实时荧光定量PCR检测服务。通过对DNA或RNA的荧光定量PCR监测, 实现对基因的相对定量、绝对定量和定性分析。

　　2.服务内容

　　1：mRNA 的定量分析：

　　荧光定量PCR可以利用内参基因对实验基因的表达进行相对定量分析，也可以通过外用标准品对实验基因进行绝对定量分析。

　　2：miRNA 的定量与定性分析：

　　MicroRNA(miRNA)成熟体是由21—23个碱基构成的含有发夹结构的单链小分子RNA，长度太短不能通过普通的实时定量PCR进行检测。因此，我们通过加尾法(在miRNA的3’段加一个polyA尾巴)及颈环法(设计特殊的含有茎环结构的反转录引物，配合实时定量PCR引物及探针)可以精确检测微量样品中microRNA表达水平。

　　3：lncRNA的定量与定性分析：

　　长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)与mRNA相比是不编码蛋白的，但又比miRNA要长(大于200nt)，研究证明ncRNA 能在表观遗传、转录及转录后水平上调控基因表达，与人类疾病的发生、发展和防治有着密切的联系。我公司可设计特异性引物对lncRNA进行定量分析。

　　4：定性分析

　　荧光定量PCR还可以用来检测单核苷酸多态性(SNP)、点突变、等位基因以及DNA甲基化等。能够简单快速地对目的基因进行高特异性、高灵敏度的检测，同时闭管操作的实时检测可以有效防止反应产物的污染。

　　3.主要过程

　　4.服务说明

　　1：在服务开始前，请先咨询我们公司。我们会针对您的实验目的设计个性化的最优实验方案。

　　2：客户提供的实验材料必须在正确的条件下保存和运输(上海本地客户我们可以上门提取)。我们不推荐直接提供RNA或cDNA样品，除非能证明提供的样品质量可以用于荧光定量PCR。

　　3：客户需提供尽可能详细的实验背景信息(包括物种信息，目的基因信息等)。

　　4：客户可以自己提供荧光定量PCR引物，也可以由我们设计并合成，但需收取相应费用。

　　5：为了确保实验数据的可靠性，每个样品我们都采用三复孔，且保证熔解曲线的单一性。

　　5.服务周期

　　实验周期视具体的样品数量及需测定的数据数目而定。

　　6.客户所得

　　1：荧光定量PCR的原始数据及分析结果;

　　2：完整的实验报告(包括实验材料，步骤，结果分析等);

WesternBlot 服务

　　1.服务描述

　　Western Blot 实验首先通过变(SDS-PAGE)电泳将蛋白质混合物进行分离，然后将其转移至固相支撑物(NC膜，PVDF膜)上。这时的蛋白质是以非共价键形式吸附在固相支撑物上，固相支撑物经目的蛋白的一抗和酶标二抗孵育后，即可通过底物显色来检测目的蛋白的表达。该方法是蛋白质工程研究中的常规技术。

　　2.服务内容

　　1：样品蛋白质的抽提与定量;

　　2：摸索，优化实验条件并完成Western Blot 实验;

　　3：图片分析;

　　3.服务说明

　　1：我们接受任何形式的实验样品(组织、细胞及蛋白质混合溶液等);但客户必须提供足量的满足实验要求的样品。同时应注意避免样品之间交叉污染，及样品的反复冻融;

　　2：客户需自己提供实验用一抗，也可以由我公司代购(实验完成后剩余抗体返还客户);

　　3：我们采用PVDF膜作为固相支撑物，每张膜可以检测10个蛋白样品(包括蛋白质分子量标准)。

　　4.客户所得

　　1：剩余的实验样品(包括客户提供的一抗);

　　2：Western Blot曝光原始底片及处理后图片;

　　3：完整的实验报告;