免疫组化/IHC组织染色实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做
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免疫组化/IHC组织染色实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做

产品属性

  • 品牌中科赛恩斯
  • 产地全国
  • 型号免疫组化/IHC组织染色实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做
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哈尔滨中科赛恩斯生物技术有限公司

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产品描述
实验原理

免疫组化,是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。
该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。


 
实验流程
 
  • 将石蜡切片放置于60°烤箱烤片30-60min,而后依次将其放入二甲苯I、II、III各10min,乙醇梯度各2min,水洗5min。PBS洗3次,3 min/次。用预热的封闭通透液浸润切片30min,降低内源性过氧化物酶的活性。PBS洗3次,3 min/次。甲醛固定使得蛋白之间交联及醛基的封闭作用从而失去抗原性。
  • 用与二抗同一来源的血清封闭一些非特异性结合位点。37℃温箱中30min,用滤纸吸去多余的血清。对组织滴加稀释好的一抗20ul,4℃过夜或者37℃ 1-2h。PBS洗3次,3 min/次。对组织滴加稀释好的二抗20ul,37℃ 1-2h,PBS洗3次,3 min/次。
  • 用DAB-H2O2显色10min,显色液最好是现用现配,此时要通过显微镜观察染色是否明显,10min内即可用蒸馏水终止显色。用Mayer苏木素染色30s,水洗,盐酸酒精分化2s,流水浸入15min。脱水时,乙醇梯度各2min。二甲苯5min使切片透明化,最后加入中性树胶封片拍照。
 
合作流程
 
  • 咨询客服,提供实验方法、内容以及相关实验要求,项目员、技术员对实验项目进行可行性评估。
  • 出具项目报价,签订实验服务合同,双方保密协议,出具详细实验方案,客户寄送实验样本和实验试剂,
  • 技术员根据实验方案开展预实验,网站个人中心实时更新实验进度,实验完成出具详细实验报告。
 
实验须知
 
  • 中科赛恩斯生物坚决秉承“严肃严谨、死磕真实、拒绝造假、绝对保密”的科学服务精神,以及严格的契约精神,为您提供优质实验服务。
  • 根据客户实验预期效果,进行一定的实验文献检索,重要步骤均使用知名品牌试剂/设备进行每一步的操作质控。
  • 严谨的预实验设置,根据说明要求设置参照样本,用2-3种方式进行实验,为正式实验提供最佳实验条件。
  • 使用GraphPad 软件作图,并标记显著性,提供.pzf源始文件。分析数据的原始Al文件和导出的.tif图片,提供完整的实验报告(含:实验分组、实验结果、实验结论、实验步骤)。
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