基因过表达基因编辑实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做
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基因过表达基因编辑实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做

产品属性

  • 品牌中科赛恩斯
  • 产地全国
  • 型号基因过表达基因编辑实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做
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哈尔滨中科赛恩斯生物技术有限公司

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产品描述
实验原理

基因过表达的基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达。建立目的基因过表达模型,可用于研究基因功能、基因剂量效应、启动子功能、模拟人类疾病发病机制等。 根据基因整合位点的确定性。
将目的基因连接在特定的载体上,载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter,不同系统中采用的promoter完全不同。在大肠杆菌,酵母和哺乳动物细胞中,构建的外源质粒直接导入细胞即可,这个过程称为转化或转染。构建的质粒还需要先转座成为杆状病毒基因组才能用于转染。


 
实验流程
 
  • 定点条件性基因过表达:Rosa26位点是目前最为常用的定点整合位点之一。它位于小鼠6号染色体,是一个非编码基因,已被证明在大部分组织和细胞中都有表达。表达比较活跃的基因区域因为需要转录因子的进入基因组结构不会被异染色质化,因此在这个区域定点插入外源DNA,在各组织中表达的可能性都非常高。所以,Rosa26被广泛用来作为外源基因表达的安全位点。
  • 随机整合转基因:利用高效PB转座子系统,更高效地获得转基因小鼠模型。将目的片段克隆至PiggyBAC转座子质粒中,与转座酶一起注射到小鼠受精卵中;在转座酶作用下,目的片段会被整合到基因组上的TTAA位点处,获得转基因小鼠。由于piggyBac转座子在转座酶的辅助下特异性识别基因组中5’-TTAA-3’位点,精确地剪切和插入不留下印迹,并且在随机插入基因组的过程中,更倾向于插入有活跃转录的位置,故而能够大幅提高转基因小鼠外源基因的表达阳性率。
 
合作流程
 
  • 咨询客服,提供实验方法、内容以及相关实验要求,项目员、技术员对实验项目进行可行性评估。
  • 出具项目报价,签订实验服务合同,双方保密协议,出具详细实验方案,客户寄送实验样本和实验试剂,
  • 技术员根据实验方案开展预实验,网站个人中心实时更新实验进度,实验完成出具详细实验报告。
 
实验须知
 
  • 中科赛恩斯生物坚决秉承“严肃严谨、死磕真实、拒绝造假、绝对保密”的科学服务精神,以及严格的契约精神,为您提供优质实验服务。
  • 根据客户实验预期效果,进行一定的实验文献检索,重要步骤均使用知名品牌试剂/设备进行每一步的操作质控。
  • 严谨的预实验设置,根据说明要求设置参照样本,用2-3种方式进行实验,为正式实验提供最佳实验条件。
  • 使用GraphPad 软件作图,并标记显著性,提供.pzf源始文件。分析数据的原始Al文件和导出的.tif图片,提供完整的实验报告(含:实验分组、实验结果、实验结论、实验步骤)。
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