Crispr/Cas9 简介

CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前，来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用广泛。Cas9 蛋白（含有两个核酸酶结构域，可以分别切割DNA 两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物，然后通过PAM序列结合并侵入DNA，形成RNA-DNA复合结构，进而对目的DNA双链进行切割，使DNA双链断裂。

CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞，是目前高效的基因组编辑系统。

通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造，将其连接在一起得到sgRNA（single guide RNA）。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力，但因为结构得到了简化更方便研究者使用。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接，得到可以同时表达两者的质粒，将其转染细胞，便能够对目的基因进行操作。

海科生物创新性的首次将cas9和gRNA整合到腺病毒载体中，成功包装cas9腺病毒和gRNA腺病毒，很大程度上弥补了crispr/cas9质粒感染效率低，从而导致敲除效率低的缺陷。

海科生物推出的Cas9/gRNA腺病毒利用cas9和gRNA结合特异性，同时借助腺病毒高感染效率，高表达效率，提高crispr/cas9基因敲除效率，缩短基因敲除周期，使得基因敲除周期短，成本低，更易于操作。

Crispr/Cas9腺病毒特点：
   

1、可感染多种分裂期和非分裂期细胞，感染效率高、敲除效率高；

2、操作简单，容易掌握；

3、基因敲除周期短，成本低；

4、适合哺乳动物不同种属不同基因的操作，适用范围广。

服务流程

参考文献

   1、Laterodorsal tegmentum interneuron subtypes oppositely regulate olfactory cue-induced innate fear；

     （2016年发表于Nature Neuroscience，作者：段树民）

   2、Endoplasmic reticulum stress induced by tunicamycin and thapsigargin protects against transient ischemic brain injury Involvement of PARK2-dependent mitophagy；

     （2016年发表于Autophagy作者：Xiangnan Zhang）

   3、SNX13 reduction mediates heart failure through degradative sorting of apoptosis repressor with caspase recruitment domain；

     （2016年发表于Nature Communications，作者：陈义汉）

   4、TRB3 links insulin IGF to tumour promotion by interacting with p62 and impeding autophagic proteasomal degradations；

     （2016年发表于Nature Communications，作者：胡卓伟）

   5、Suppression of KRas-mutant cancer through the combined inhibition of KRAS with PLK1 and ROCK；

     （2016年发表于Nature Communications，作者：刘明耀）

   6、POH1 deubiquitylates and stabilizes E2F1 to promote tumour formation；

     （2015年发表于Nature Communications，作者：Yongzhong Liu）