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价格:
4998 - 7998
crispr/cas9 knock out POOL
产品属性
品牌
新开源晶锐
产地
广州
型号
crispr/cas9 knock out POOL
关注度
0
信息完整度
价格范围
关闭
产地:广州; 品牌:新开源晶锐
新开源晶锐(广州)生物医药科技有限公司
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产品描述
CRISPR/Cas9
基因敲除基本实验流程
确定待敲除基因的靶位点
设计识别靶位点的识别的一对
DNA Oligo
(引物)
构建可表达
sgRNA
的
Cas9
质粒
含
sgRNA
表达元件的
Cas9
质粒的活性检测
利用
Cas9
质粒建立
knock-out
细胞系
技术
优势
无基因序列、细胞、物种限制;
实验设计简单准确、实验周期短、成本低;
成功率几乎可达
100%
;毒性低,使用带点突变的
Cas9(D10A)
可避免脱靶效应(
Cell. 2013 Sep 12;154(6):1380-9
)。
活性明显高于人工构建的
ZFN
和
TALEN
核酸酶活性。
克服了常规的
ZFN
和
TALEN
方法中制备有活性的人工合成核酸酶较繁琐的确点,更有专业网站辅助设计可特异识别目标基因的
gRNA
,设计过程非常简单易行。
CRISPR/Cas9
技术是在
DNA
水平上进行基因敲除,将暂时性的基因敲降(
Knock down
)如
RNA
干扰(
RNAi
)和
MO
敲降等转变成永久性的基因敲除(
Knock Out
)转变,建立的稳定可传代的基因敲除的细胞系或突变体系可极大地方便研究者的深入研究。
融
Cas9
、
sgRNA
和报告基因于一个质粒,一个质粒搞定一个基因的修饰。更有报告基因,方便使用荧光显微镜或药物筛选,加速获得基因突变的细胞系。
客户需提供
需要敲除的目的基因名及
NCBI ID
敲除目的基因的细胞
目的基因表达的蛋白的相应抗体(选做)
交付结果
表达载体
基因敲除后的细胞
基因敲除后细胞的
T7E1,
western blot
结果图(选做)
实验报告
实验周期
~30个工作日
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