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价格:
100
实时荧光定量PCR(real-time PCR)
产品属性
品牌
研载生物
产地
中国
型号
实时荧光定量PCR(real-time PCR)
关注度
0
信息完整度
价格范围
1-500
关闭
产地:中国; 品牌:研载生物
研载生物科技(上海)有限公司
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产品描述
一、技术简介
实时
PCR(real-time PCR)
,属于定量
PCR
(
Q-PCR
)的一种,以一定时间内
DNA
的增幅量为基础进行
DNA
的定量分析。
Real time PCR
的定量使用荧光色素,目前有二种方法。一种是在
ds DNA
中插入特异的荧光色素,例如
SYBR Green
荧光染料;另一种使用一种能与增幅
DNA
序列中特定寡核酸序列相结合的一种荧光探针(
probe
),如
Taqman
探针。两种方法原理不同。
SYBR Green
荧光染料游离时不发光,当反应体系中存在双链
DNA
时,
SYBR Green
与双链
DNA
结合,此时才发光。
Taqman
探针带有一个荧光基团和一个淬灭基团,荧光基团连接在探针的
5’
末端,而淬灭基团则在
3’
末端。
PCR
扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;
PCR
扩增时,
Taq
酶的
5′
-
3′
外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,此时荧光基团发出的荧光信号可以被检测到。
real time PCR
与
reverse transcription PCR
相结合,能用微量的
RNA
来找出特定时间、细胞、组织内的特别表达的遗传基因。这两种
RT PCR
的组合又被称之为
“
定量
RT-PCR
(
quantitative RT-PCR
)
”
。
二、实验流程
1.
提取
RNA
。
2.
DNA
se I
消化样品
RNA
中的
DNA
。
3. RNA
琼脂糖凝胶电泳
。
4. RNA
反转录为
cDNA
。
5. cDNA
与引物质量检测。
6.
利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况。
7.
定量
PCR
检测。
8.
分析扩增曲线和溶解曲线。
三、服务说明及结果
1.
客户提供:样本。
2.
公司提供:高质量的
RNA
、
扩增曲线图、熔解曲线图、完整报告。
3.
实验周期:
5-
10
个工作日
。
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