透射电镜检测
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透射电镜检测

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  • 品牌研载生物
  • 产地全国
  • 型号透射电镜检测
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研载生物科技(上海)有限公司

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产品描述
                           
透射电镜检测
一、技术简介
   透射电子显微镜(Transmission Electron MicroscopeTEM)是使用最为广泛的一类电镜。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。透射电镜具有分辨率高和放大倍数高的优点。其分辨率为0.1-0.2nm,放大倍数为几万到几十万倍。目前透射电镜已经广泛的应用到癌症研究,病毒学研究,微生物学,细胞学研究等生物领域。
   透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,因此可以形成明暗不同的影像。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备超薄切片(通常为50-100 nm)。要在机体死亡后的数分钟内取材,组织块要小(1mm3以内),常用戊二醛和锇酸双重固定,包埋介质包埋,用超薄切片机切成薄片,再经醋酸铀和柠檬酸铅等进行电子染色。
二、实验流程
透射电镜生物样品制备步骤:
1. 固定:用2.5%的戊二醛固定2小时。
2. 锇酸固定:用2%的锇酸固定2小时。
3. 脱水:用50%70%80%90%乙醇梯度脱水各15min(70%乙醇中过夜),再用100%乙醇脱水3次,每次20min
4. 置换:用丙酮置换2次,每次15min
5. 浸渍:
a.丙酮:包埋剂=12的浸渍液浸渍4h
b. 纯包埋剂浸渍2次,每次4h

6. 包埋:将样品放入盛有纯包埋剂的包埋板中。
7. 聚合:将包埋板置于65℃条件下各聚合48h以上。
8. 修块:将包埋头修成梯形,且样品表面积小于0.2mm×0.2mm

9. 超薄切片:切片机切片 50-70 nm
10. 染色:3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色。
11. 透射电镜观察,拍片。
三、服务说明及结果
1. 客户提供:
1 mm3 左右的组织块,取材部位要求尽量精准。
如为细胞,细胞数需≥106
2. 公司提供:基本实验步骤、药品、样品处理、图片及图片分析。
3. 实验周期:25-30个工作日。
 


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