快速导航
首页
资讯类
资讯
专题
会议
锐客
标准
方法
行业类
快检
食品
环境
材料
化工
生物
制药
临床
仪器类
仪器
Lab
新品
导购
电商
互动类
直播
x
价格:
面议
重组蛋白原核表达纯化技术服务
产品属性
品牌
晶诺生物
产地
上海
型号
重组蛋白原核表达纯化技术服务
关注度
0
信息完整度
关闭
产地:上海; 品牌:晶诺生物
上海晶诺生物科技有限公司
其他会员
进入商铺
全部产品
产品描述
技术原理与实验步骤
将目的基因片段连接至合适的原核表达载体后,转化到大肠杆菌
BL21
(
DE3
)菌株内,随后利用菌自身的蛋白表达系统通过温度和诱导剂的控制,诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质,将表达样品进行
SDS-PAGE
以检测表达蛋白质。原核表达系统是至今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统,其优点是实验周期短、成本低、产量高。
优势
队伍专业,熟练掌握密码子优化、载体构建、等电点分析、表达纯化、包涵体变性复性等操作,在蛋白表达纯化及发酵生产实战经验丰富;仪器完备,拥有蛋白纯化所需的离子柱、分子筛、亲和柱、疏水柱、
AKTA purifier
系统。
密码子优化
根据原核细胞蛋白表达密码子偏好进行密码子优化,完善蛋白表达,解决蛋白无法表达及包涵体蛋白等问题。
原核表达
构建原核表达质粒,转化到
BL21
感受态细胞,
IPTG
诱导表达。
包涵体变性复性
蛋白在原核细胞中表达后,有时无法分泌到细胞质中,而是以包涵体的形式存在,无法从上清中获取,需收集包涵体,对包涵体进行变性复性,获取目的蛋白。
纯化
蛋白表达纯化专业人员,对研究蛋白进行等电点分析、疏水性分析等,丰富的经验,熟练的队伍,快速优质的纯化蛋白。
内毒素检测及去除
内毒素是菌体破裂后产生的毒素,主要成分是类脂质
A
,会引发人体发热、休克、白细胞反应等免疫反应,对于药用蛋白产品,需将内毒素清除,否则会引发安全问题。
服务流程
依据客户提供的蛋白基因、载体要求,设计克隆方案,构建原核表达载体。可提供
6xHis
、
GST
、
MBP
等携带标签及肠激酶、凝血酶等蛋白酶切除标签蛋白的表达载体,提供多种选择;
将构建好的质粒转化到大肠杆菌
BL21
(
DE3
)菌株内,优化温度、
IPTG
浓度等条件诱导蛋白表达,
SDS-PAGE
验证;
对蛋白性质进行分析,选择合适的方法分离纯化蛋白;
依据客户要求如蛋白纯度、是否需要带标签、带何种类型的标签、蛋白溶解缓冲液要求,是否冻干等提供最终蛋白产品,附加载体构建报告、
SDS-PAGE
检测报告、目的基因质粒、重组细菌菌株、重组表达菌株等信息。
上一篇:
质粒构建定制服务
下一篇:
结核分枝杆菌荧光标记菌株构建技术服务eGFP、mCherry等多种荧光
店铺
收藏
咨询留言
一键拨号