蛋白表达纯化技术服务(Protein Expression and Purification Services)
制备高质量、高纯度、高天然保真性的蛋白,是许多实验关键性的第一步。艾柏森生物致力于提供用于全球领先的蛋白质表达和纯化系统。作为蛋白与抗体制备服务高品质供应商,我们深刻领悟建立方便和易于使用的蛋白高表达和纯化系统的重要性。
为了使每一种交由我们完成的蛋白样品都能找到最高效,同时最接近天然宿主的最优表达体系,公司一方面从基础材料入手,改进了一大批高效表达的分子工程载体并申请了专利技术,另一方面,也建立了完善的各类蛋白表达体系,具体包括:
细菌表达系统(大肠杆菌/芽孢杆菌)
酵母表达系统(P酵母/ S酵母)
杆状病毒 - 昆虫细胞表达系统
哺乳动物表达系统(CHO / 293)
膜蛋白生产专利系统(新)
与同行相比,我们的技术优势在于:
专有技术
确保您的蛋白表达和纯化
有竞争力的价格
快速周转:少4周
灵活的规模化生产蛋白质
酵母蛋白表达系统(Protein Expression in Yeast)
毕赤酵母表达系统介绍
毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是近年来发展迅速、应用广泛的一种真核表达系统。它是甲醇营养型酵母菌,有两个乙醇氧化酶(Alcohol oxidase, AOX)编码基因AOX1和AOX2,两种序列相似,AOX1基因严格受甲醇诱导和调控。当甲醇为唯一碳源时,AOX1启动子可被甲醇诱导,启动乙醇氧化酶的表达,从而用甲醇进行代谢,含AOX1启动子的质粒可用来促进编码外源蛋白的目的基因的表达。
表达菌株特点
GS115:AOX1和AOX2基因都正常表达AOX蛋白(乙醇氧化酶),甲醇的利用率高,接近于野生型,属于甲醇快速利用型(Mut+)
KM71:AOX1基因被大部分剔除,只能利用AOX2为AOX编码,甲醇的利用速率变慢,表现为甲醇慢利用型(Muts)
外源基因的整合方式不同会导致表达菌株的表型不同:
菌株表型
常用表达载体及筛选标记
载体信息
信号肽
对于胞外表达的蛋白除了可以用载体自带的信号肽,还有以下信号肽可供选择:
信号肽序列
毕赤酵母表达系统的优势
含有特有的强有力的AOX(醇氧化酶基因)启动子,用甲醇可严格地调控外源基因的表达。
培养成本低,产物易分离,毕赤酵母所用发酵培养基成本合理,一般碳源为甘油或葡萄糖及甲醇,其余为无机盐,培养基中不含蛋白,有利于下游产品分离纯化。
外源蛋白基因遗传稳定,外源基因能以高拷贝数整合到毕赤酵母基因组中,不易丢失并能得到高表达菌株。
作为真核表达系统,毕赤酵母具有真核生物的亚细胞结构,具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻译后修饰加工功能。
艾柏森生物酵母表达系统的优势
具备完备的毕赤酵母表达平台,可以根据蛋白特性或客户的需求设计不同的实验方案;
具有高通量的筛选平台,可以快速有效的得到最佳表达条件;
具有大规模发酵生产能力