FRET技术
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  • 品牌安诺伦
  • 产地北京
  • 型号FRET技术
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安诺伦(北京)生物科技有限公司

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产品描述
步骤服务内容服务描述
1实验方案制定根据客户提供信息,进行风险评估等,制定实验方案。
2细胞培养根据实验培养特定的细胞用于转染,观察检测分子在细胞内的相互作用;
3细胞转染构建质粒载体 CFP-A 和 YFP-B,将检测的 AB 蛋白分别偶联上荧光蛋白 CFP 和 YFP,并将两个质粒共转染到培养的细胞内
4检测 FRET质粒载体 CFP-A 和 YFP-B 转染细胞 10h、12h、18h、24h、36h、48h、72h 后检测,是
否发生 Fret;
5图像采集确定 FRET 配对的激发波长, 蓝光被调谐分别用于探测最大和最小的供体和受体信号,
最大供体信号和最小受体信号对应的波长用于收集双表达细胞的 FRET 信号。调整激光变化,以便获取最
大 CFP 信号和最小 YFP 信号的激发光波长,采集供体和受体图像,收集 FRET 信号。每个细胞 FRET 检
测重复 3 次,每种转染至少完成 6 个细胞的 FRET 检测
6数据处理去除 FRET 信号中 DSBT 和 ASBT 的光谱串色信号; 受体通路的 FRET 信号需要对
供体受体光谱灵敏度的变化进行矫正、对自发荧光和光学噪声进行矫正; 利用矫正系数对双标定细胞进行
象素匹配矫正
 实验报告上述各步骤详细实验结果;实验耗材等详细信息;可以为客户定制试验服务。



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