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基因编辑细胞株构建
产品属性
品牌
铭时生物
产地
上海
型号
基因编辑细胞株构建
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信息完整度
关闭
产地:上海; 品牌:铭时生物
铭时生物科技(上海)有限公司
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稳健细胞株构建
产品描述
基
因组编辑技术(genome editing)是一种可以在基因组水平上对DNA序列进行改造的遗传操作技术。这种技术的原理是构建一个人工内切酶,在预定的基因组位置切断DNA,切断的DNA在被细胞内的DNA修复系统修复过程中会产生突变,从而达到定点改造基因组的目的。DNA修复系统主要通过两种途径修复DNA双链断裂(double-strand break,DSB),即非同源末端连接(Nonhomologous end joining, NHEJ)和同源重组(homologous recombination, HR)。
基因编辑细胞株包括基因敲除细胞株、基因敲入细胞株、点突变细胞株和过表达细胞株等。
基因敲除细胞株
CRISPR-Cas9
这种靶向特异的DNA内切酶切割目的DNA产生双链DNA断裂(DSB),断裂的DNA招募细胞内DNA修复机器进行修复。在没有外源同源DNA序列时,细胞主要通过NHEJ途径将断裂的DSB位点连接起来。NHEJ介导的连接保真性不高,容易产生插入或者缺失(indel),往往导致蛋白质编码基因的移码突变,进而产生基因敲除。
常见基因敲除细胞株类型
分类标准
类别
基因敲除策略
移码突变、片段敲除、多基因敲除等
细胞类型
肿瘤细胞、细胞株、IPS等
基因激活细胞株构建
将切割活性缺失的Cas9蛋白(dCas9)与转录因子(TF,如VPR等)融合,利用dCas9可在sgRNA指导下结合于基因的启动子区域,融合的转录因子招募其他转录机制,从而提高此基因的转录水平,实现基因的功能增强(gain of function)。
点突变和基因敲入细胞株
利用CRISPR/Cas9系统将基因组的特定位点切开,同时提供供体序列(Donor Sequence)作为模板,利用同源重组修复,达到点突变或基因敲入的目的。
服务流程
我们可以提供基因敲除,基因敲入,基因过表达,点突变等细胞株的构建
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