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成骨细胞诱导
产品属性
品牌
怀信生物
产地
江苏无锡
型号
成骨细胞诱导
关注度
0
信息完整度
关闭
产地:江苏无锡; 品牌:怀信生物
无锡怀信生物医药科技有限公司
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产品描述
一、成骨细胞诱导介绍
培养器皿表面的明胶包被
为了避免诱导过程中MSCs出现漂浮现象,建议对成骨诱导使用的培养器皿表面进行明胶包被。
操作
1、 加适量0.1%明胶到培养器皿中,能覆盖整个培养器皿底面的量即可。
2、 摇匀液体使其覆盖整个培养器皿的底面。
3、将铺有0.1%明胶的培养器皿放置在超净台至少30min。
4、30 min后弃去明胶,待培养器皿晾干后,即可用于接种细胞。
另:包被明胶的培养器皿在无菌和明胶不蒸干的条件下,可以在
4
℃保存两周。
成骨诱导分化操作规程:
所需材料:
1、PBS,0.25% Trypsin-EDTA
2、原代MSCs
3、怀信生物成骨诱导分化培养基
操作方法与步骤
为了得到最好的诱导结果,请按照以下步骤操作(以六孔板为例):
1、原代的MSCs分离后,置于37℃,5%CO
2
培养箱中培养,每2-3天换液或传代。
2、建议使用低代次的MSCs(<8代,随着传代后代次的增加,多向潜能的能力也逐渐降低)。当细胞融合度达到60-80%时,用0.25%Trypsin-EDTA进行消化进行传代。
3、收集细胞,按照5X10
3
cells/cm
2
的细胞密度接种在预先用明胶包被的六孔板中,每孔培养基2ml,37℃,5%CO
2
培养。
4、待细胞融合度达到60-70%,开始诱导,小心弃去培养基,并小心沿壁加入37℃预热的成骨诱导分化培养基。
5、 每隔3天更换新鲜预热过成骨诱导分化培养基。
6、诱导2周后,为尽可能避免成骨细胞卷边,脱落,每3天全换液更换为每2天半量换液,直至诱导出现大量矿化结节。
注意:为避免成骨细胞卷边,脱落:
1、不要长时间的在培养箱外观察
2、培养基一定要预热
3、避免晃动培养板
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