由于同一个样本中的不同蛋白和肽段离子化效率不同,绝对定量的信息获取具有很大挑战。利用质谱多反应监测(multiple reaction monitoring, MRM)技术与同位素稀释相结合,通过对比已知浓度的标记标准品与待测样子目标离峰面积信息,从而推算分析物含量。
实验流程
技术优势
· 灵敏度高
· 重现性好
· 准确度高
· 通量高
应用领域
· 标志物的验证和绝对定量研究
· 翻译后修饰等缺乏抗体的特殊蛋白质和肽段的验证和绝对定量研究
· 基因突变、可变剪切、基因表达多态性在蛋白质表达方面的确证和定量
· 极低丰度蛋白质的靶向检测
送样要求
样本 样品要求 蛋白样本 每组样品300µg 蛋白质,重复的话翻倍,一般建议客户准备两份样品备用。 组织样本 按照蛋白质组织提取效率(蛋白:组织=7%),考虑提取后续验证研究样本方便,建议0.1g 左右或更多组织。 细胞样本 107个细胞,胰酶消化,按细胞冻存标准离心收集细胞即可。 体液样本 血清 200µL以上,脑脊液200µL 以上,尿液1mL ,泪液 1mL.
参考文献