二、注意事项 1、在分离外周血单个核细胞过程中,将稀释血液加于分层液上时,要避免冲散分层液面,而要使之形成良好的界面,否则影响分离结果。 2、此法操作得当,单个核细胞得率可达80%-90%,影响得率最重要的因素是分层液的比重。...
免疫细胞的分离: (1)外周血单个核细胞的分离 外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重与红细胞、多核白细胞及血小板不同,介于1.075-1.090之间,因而可利用一种比重介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心,使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。常用的分层液有Ficoll与Percoll两种。 ...
外周血单个核细胞即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞,目前主要的分离方法是Ficoll-hypaque(葡聚糖-泛影葡胺)密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异最多12天,但需要刺激。 PBMC(外周血单个核细胞)是原代细胞,单纯在体外培养是养不活PBMC的,最多活几天,细胞肯定是慢慢死掉的。...
1、材料与方法1.1 外周血造血干细胞 APBSC采集自经环磷酰胺(CTX)+重组 人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员后的实体瘤患者(淋巴瘤、乳腺癌),采集使用CS3000- Plus血细胞分离机(Baxter公司,美国)。1.2 CD34+细胞的标记 对10份APBS C分别进行2种不同再处理与CD34标记。 ...
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