CRISPR/Cas9 敲除技术

       CRISPR/Cas9敲除技术的原理是Cas9结合到sgRNA上，sgRNA的引导序列与基因组DNA中的靶标序列结合，Cas9切割靶标序列产生双链断裂，迫使细胞进行紧急修复，通常条件下，细胞偏向于使用非同源末端连接（NHEJ：nonhomologous DNA end joining）的方式对断裂的双链进行修复，从而造成靶位点基因的插入或缺失突变，发生移码突变可以完全敲除目标蛋白。
CRISPR/Cas9基因敲除技术是继TALEN基因敲除技术之后又一大突破，具有操作简便，周期短，敲除效率高，作用靶点多，无基因、细胞及物种限制，目的基因的大小不受限制，不受转录本数量影响等优势，逐渐成为基因敲除的标准操作工具。

CRISPR/Cas9 敲除对照质粒的结构

       CRISPR/Cas9敲除对照质粒以pXC9-puro慢病毒载体为骨架。pXC9-puro可用于构建稳定细胞株，为单质粒系统（能同时表达sgRNA和Cas9），具有Puro抗性基因。

CRISPR/Cas9敲除对照质粒结构图

 

CRISPR/Cas9敲除对照质粒的sgRNA引导序列

       CRISPR/Cas9敲除对照质粒的sgRNA引导序列如下，在人（Homo sapiens）、小鼠（Mus musculus）、大鼠（Rattus norvegicus）等的基因组中没有靶点。
 

 

pXC9-puro-C00015´-ACGGAGGCTAAGCGTCGCAA-3´pXC9-puro-C00025´-CGCTTCCGCGGCCCGTTCAA-3´pXC9-puro-C00035´-ATCGTTTCCGCTTAACGGCG-3´pXC9-puro-C00045´-GTAGGCGCGCCGCTCTCTAC-3´

 

提供结果

1、CRISPR/Cas9敲除对照质粒：20μg，浓度500ng/μL以上，超螺旋率95%以上。
2、CRISPR/Cas9敲除对照质粒的测序图谱、酶切鉴定结果和序列。
3、随时出货。