前言 

蛋白水解靶向嵌合体 (PROteolysis TArgeting Chimeras,  PROTACs)，是一种利用泛素-蛋白酶系统 (Ubiquitin-Proteasome  System, UPS) 对靶蛋白进行降解的药物开发技术。PROTAC是一个 两端含有不同配体的化学分子，一端是结合E3连接酶的配体，另 一端是结合细胞内蛋白质的配体，这两个配体再由一段连接子连 接起来。这样的化学分子既可以结合E3泛素连接酶，又可以结合 细胞内蛋白质，通过把靶向的蛋白质招募到E3泛素连接酶附近来 实现靶向蛋白质的多泛素化，最后被蛋白酶体降解。PROTAC的特 点是可以循环使用，而不被蛋白酶体降解。在患者体内，PROTAC 的靶蛋白配体和靶蛋白结合，E3泛素连接酶配体和细胞内的E3泛 素连接酶的底物结合区结合，从而通过连接子把靶蛋白拉进到E3 泛素连接酶旁边，实现UPS系统将靶蛋白降解[1]。 

GNE-987是一种降解溴结构域蛋白4 (BRD4) 的PROTAC，由VHL 配体、BRD4配体与间隔基团组成，具有皮摩尔级别的BRD4降解活 性，所以这也给它的安全性和活性评价带来了一定难度。 

 本方法采用甲基叔丁基醚萃取法将样品进行前处理，氮气 吹干并复溶的方式，通过SCIEX Triple Quad™ 系统对大鼠血浆中 PROTAC药物GNE-987进行直接定量分析，该方法特点如下： 

1.SCIEX Triple Quad™ 系统，仪器操作简便，能够对目标物实现 高灵敏度和高稳定性的检测；

2. 采用甲基叔丁基醚对血浆样品进行萃取后，再吹干复溶，样品 处理周期短，开发成本低，可获得较高的提取回收率，有效避 免基质效应产生； 

3. 方法检测灵敏度高，LLOQ可达2 pg/ml，浓度范围在2 pg/ml ~  10 ng/ml呈良好的线性关系，低浓度点连续进样6针，%CV小于 6%。