重组蛋白类药物是由遗传修饰的原核或真核宿主细胞培养/发酵 产生，在此过程中，宿主细胞也共同产生与正常细胞功能相关 的蛋白质，由于细胞凋亡/死亡/裂解，其他非必需蛋白质也可 能释放到细胞培养基/发酵液中，因此残留在终产品中的其他蛋 白质即为宿主细胞残留蛋白（HCPs）。HCPs的存在主要影响 药物的安全性和有效性，如引起机体免疫反应，作为佐剂以增 强对药物产品的免疫应答，以及具有蛋白水解活性的HCPs影响 药物产品的稳定性[1][2][3]，因此生物医药公司不断优化其纯化工 艺，从而控制终产品中HCPs的种类和含量。ICH 的Q6B指导方 针指出需采用具有高灵敏度和宽动态范围的方法监测HCPs，要 求其含量尽可能的低，甚至低于检测限，不同产品要求不同， 一般在1-100ng/mg（1-100ppm）范围内，然而并未规定其检 测的具体分析方法。目前Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)因其具有高灵敏度、高通量和易操作优势成为工业界的 金标准，但其存在很多限制，包括不能对HCPs进行精准鉴定， 低丰度HCPs的检测易受限于高丰度蛋白的干扰，定量动态范围 （3个数量级）较低，抗体受限，开发周期长，无法改变已有的 方法，缺少校正标准限制定量的准确性，因此需多种检测方法 相结合[4]。随着高分辨质谱技术性能的不断提升，已具有高灵 敏度和宽的定量动态范围，以及蛋白质组学技术的飞速发展， 可实现对未知蛋白质的高通量定性和定量。但由于HCPs含量极 低，且酶切后与高含量的主成分存在共洗脱，对低含量HCPs的 鉴定仍存在挑战，为进一步提升质谱检测方法的动态范围，需 对样品前处理及液相方法进行优化。