应用优势 

使用ACQUITY™ UPLC™ I-Class PLUS系统改善长时间缓梯度方法的保留时间重现性。

简介 

方法开发的最终目标是获得优秀的液相色谱方法，得到可靠且可重现的分析结果。许多因素都会影响方法重现性，包括但不限于：流动相添加剂、pH、梯度斜 率/时间、温度、色谱柱尺寸、填料粒径和形态，以及色谱柱的再平衡是否适合。 方法稳定性还受LC系统设计的影响。系统设计通常反映为系统或模块的性能规格，它概述了获得最佳性能的条件。例如，已知对于需要使用长时间缓梯度的方法或者那些要求单位柱体积的溶剂组成变化较小的方法，使用高压二元泵可以达到最佳性能。

很多应用都需要使用长时间缓梯度。常见的应用领域包括生物分子分析（尤其是肽图分析1和游离寡糖分析2）以及天然产物分析（包括传统中药分析3）。在本应用纪要中，我们通过运行通用肽图分析方法比较了三套高压二元LC系统的性能， 并且着重比较了这三套系统的保留时间重现性。理想情况下，在持续数日乃至数年的分析中（具体取决于分析目的），LC系统应始终能够确保不同进样以及不同分析之间的性能一致。此次评估将凸显ACQUITY UPLC I-Class PLUS系统与其它厂家的系统相比，在运行长时间缓梯度方法时的卓越重现性。

结果与讨论 

运行分析方法时，LC系统的性能和重现性会影响色谱峰的鉴定、定量以及追踪。不仅如此，诸如长时间缓梯度这样高难度的方法条件也可能对保留时间重现性产生不良影响。本研究评估了ACQUITY UPLC I-Class PLUS系统和其它两家厂家的二元UHPLC系统在运行长时间缓梯度方法分离复杂样品时的性能。ACQUITY UPLC I-Class PLUS系统形成梯度的一致性最佳，因此能够生成可重现的保留时间，从而获得高质量且可重现的数据。