1. 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。设计引物应遵循以下原则:(1)引物长度: 15-30 bp,常用为20 bp 左右。(2)引物扩增跨度: 以200-500 bp 为宜,特定条件下可扩增长至10 kb 的片段。(3)引物碱基:G+C 含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C 过多易出现非特异条带。A
Comparison of normalisation methods There is an ongoing debate what is the best way to normalise qPCR data. Reference genes are the most common method although single unverified reference genes invali
单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种。占所有已知多态性的90%以上。SNP在人类基因组中广泛存在,平均每500~1000个碱基对中就有1个,估计其总数可达300万个甚至更多。SNP所表现的多态性只涉及到单个碱基的变异,这种变异可由单个碱基的转换(
聚合酶链式反应(PCR)详细步骤
1,如果是检测基因的所有以知的SNP,那么你首先要去了解并查询到这些SNP位点吧,SNP位点可以通过查询dbSNP数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP/)和TSC(The SNP Consortium)数据库(http://snp.cshl.org/),可以获知基因及上下游邻近序列的SNP位点。2,至于挑选的原则,可以介绍一下Hap Map的正规化标准:SNP